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目的：研究不同浓度的太白楤木醇提物对四氯化碳(CCL4)制备的肝纤维化小鼠肝组织中MCP-1/CCR2通路、巨噬细胞的活性及募集、HSCs的活化和调节MMP-1/TIMP-1的平衡的影响，以及其对肝损伤的保护作用及作用机制。
方法：昆明小鼠肝纤维化模型采用CCl4橄榄油溶液腹腔注射的方法建立，50只雄性昆明小鼠随机分成5个组：空白对照组、模型组、阳性对照(联苯双酯)组、太白楤木醇提物高剂量组和太白楤木醇提物低剂量组，每组10只。除空白组外，其余各组小鼠给予CCl4橄榄油溶液(浓度为0.15ml/kg，CCl4按10%溶于橄榄油)腹腔注射造模，2次/w(周一、周四各1次)，持续8w。空白对照组小鼠则腹腔注射等量的橄榄油，2次/d，也持续8w。联苯双酯组小鼠在造模的同时给予联苯双酯溶液(125mg/kg)灌胃治疗，1次/d，持续8w。太白楤木醇提物低剂量和高剂量组小鼠在造模的同时分别给予不同浓度的太白楤木醇提物混悬液(200mg/kg、400mg/kg)灌胃治疗，1次/d，持续8w。最后一次灌胃治疗后，禁食但不禁水6小时后处理取材。按小鼠体重腹腔注射10%水合氯醛(3ml/kg)麻醉，解剖小鼠分离出肝脏，剪取部分肝脏放入4%甲醛溶液固定用于病理切片，剩余部分冻存在-80℃冰箱。采用HE染色、天狼星红染色观察小鼠肝组织形态学和胶原纤维改变；ELISA法检测小鼠肝组织匀浆MMP-1、TIMP-1含量；免疫组化SABC法检测小鼠肝组织α-SMA的表达；免疫荧光染色检测小鼠肝组织CD68的表达；Western-blot法检测小鼠肝组织TNF-α、MCP-1、CCR2蛋白的表达。
结果：①HE染色和天狼星红染色结果显示，模型组肝组织结构破坏严重，胶原生成增多，肝小叶形态改变，门管区周围可见肝细胞变性、坏死肝细胞，门管区及肝小叶内炎细胞聚集浸润，表明小鼠肝纤维化模型复制成功，且肝纤维化过程伴随着严重的炎症反应。阳性对照组与模型组比较，肝组织中胶原沉积减少，受损肝细胞逐渐修复，炎性细胞浸润减少。太白楤木醇提物高、低剂量组与模型组比较，肝组织胶原显著减少，肝小叶结构清晰可见，肝细胞排列整齐，肝板、肝血窦结构清晰，炎性细胞浸润减少，且高剂量组治疗效果优于低剂量组；②ELISA结果表明，与空白组相比，模型组MMP-1含量降低，而TIMP-1含量升高(P＜0.01)；与模型组相比，阳性对照组MMP-1含量升高，而TIMP-1含量降低，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，太白楤木醇提物高、低剂量组肝组织中MMP-1含量显著升高，TIMP-1含量显著降低(P＜0.01)，且太白楤木醇提物高剂量效果优于低剂量组。③免疫组化结果显示，与空白组比较，模型组肝组织α-SMA的表达增多(P＜0.01)；与模型组比较，阳性对照组α-SMA表达减少(P＜0.01)；太白楤木醇提物高、低剂量组α-SMA的表达均低于模型组，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，且表现出剂量依赖性；④免疫荧光染色结果显示，空白组肝组织CD68极少量表达；与空白组比较，模型组肝组织CD68的表达显著增多并增强，且多聚集于血管周围肝组织中(P＜0.01)；与模型组比较，阳性对照组CD68表达减少(P＜0.01)；太白楤木醇提物高、低剂量组CD68的表达均低于模型组，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，且表现出剂量依赖性；⑤Western-blot结果显示，与空白组比较，模型组TNF-α、MCP-1和CCR2蛋白的表达增多(P＜0.01)；与模型组比较，太白楤木醇提物高、低剂量组TNF-α、MCP-1和CCR2蛋白的表达显著降低(P＜0.01)。
结论：太白楤木醇提物通过作用于MCP-1/CCR2通路抑制巨噬细胞的激活、单核细胞向肝脏内的募集以及HSCs的活化，并通过调节MMPs/TIMPs对ECM的增生降解平衡以减少肝组织胶原纤维的积聚，从而减轻肝脏炎症并逆转纤维化的发生发展过程。
方法：昆明小鼠肝纤维化模型采用CCl4橄榄油溶液腹腔注射的方法建立，50只雄性昆明小鼠随机分成5个组：空白对照组、模型组、阳性对照(联苯双酯)组、太白楤木醇提物高剂量组和太白楤木醇提物低剂量组，每组10只。除空白组外，其余各组小鼠给予CCl4橄榄油溶液(浓度为0.15ml/kg，CCl4按10%溶于橄榄油)腹腔注射造模，2次/w(周一、周四各1次)，持续8w。空白对照组小鼠则腹腔注射等量的橄榄油，2次/d，也持续8w。联苯双酯组小鼠在造模的同时给予联苯双酯溶液(125mg/kg)灌胃治疗，1次/d，持续8w。太白楤木醇提物低剂量和高剂量组小鼠在造模的同时分别给予不同浓度的太白楤木醇提物混悬液(200mg/kg、400mg/kg)灌胃治疗，1次/d，持续8w。最后一次灌胃治疗后，禁食但不禁水6小时后处理取材。按小鼠体重腹腔注射10%水合氯醛(3ml/kg)麻醉，解剖小鼠分离出肝脏，剪取部分肝脏放入4%甲醛溶液固定用于病理切片，剩余部分冻存在-80℃冰箱。采用HE染色、天狼星红染色观察小鼠肝组织形态学和胶原纤维改变；ELISA法检测小鼠肝组织匀浆MMP-1、TIMP-1含量；免疫组化SABC法检测小鼠肝组织α-SMA的表达；免疫荧光染色检测小鼠肝组织CD68的表达；Western-blot法检测小鼠肝组织TNF-α、MCP-1、CCR2蛋白的表达。
结果：①HE染色和天狼星红染色结果显示，模型组肝组织结构破坏严重，胶原生成增多，肝小叶形态改变，门管区周围可见肝细胞变性、坏死肝细胞，门管区及肝小叶内炎细胞聚集浸润，表明小鼠肝纤维化模型复制成功，且肝纤维化过程伴随着严重的炎症反应。阳性对照组与模型组比较，肝组织中胶原沉积减少，受损肝细胞逐渐修复，炎性细胞浸润减少。太白楤木醇提物高、低剂量组与模型组比较，肝组织胶原显著减少，肝小叶结构清晰可见，肝细胞排列整齐，肝板、肝血窦结构清晰，炎性细胞浸润减少，且高剂量组治疗效果优于低剂量组；②ELISA结果表明，与空白组相比，模型组MMP-1含量降低，而TIMP-1含量升高(P＜0.01)；与模型组相比，阳性对照组MMP-1含量升高，而TIMP-1含量降低，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，太白楤木醇提物高、低剂量组肝组织中MMP-1含量显著升高，TIMP-1含量显著降低(P＜0.01)，且太白楤木醇提物高剂量效果优于低剂量组。③免疫组化结果显示，与空白组比较，模型组肝组织α-SMA的表达增多(P＜0.01)；与模型组比较，阳性对照组α-SMA表达减少(P＜0.01)；太白楤木醇提物高、低剂量组α-SMA的表达均低于模型组，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，且表现出剂量依赖性；④免疫荧光染色结果显示，空白组肝组织CD68极少量表达；与空白组比较，模型组肝组织CD68的表达显著增多并增强，且多聚集于血管周围肝组织中(P＜0.01)；与模型组比较，阳性对照组CD68表达减少(P＜0.01)；太白楤木醇提物高、低剂量组CD68的表达均低于模型组，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，且表现出剂量依赖性；⑤Western-blot结果显示，与空白组比较，模型组TNF-α、MCP-1和CCR2蛋白的表达增多(P＜0.01)；与模型组比较，太白楤木醇提物高、低剂量组TNF-α、MCP-1和CCR2蛋白的表达显著降低(P＜0.01)。
结论：太白楤木醇提物通过作用于MCP-1/CCR2通路抑制巨噬细胞的激活、单核细胞向肝脏内的募集以及HSCs的活化，并通过调节MMPs/TIMPs对ECM的增生降解平衡以减少肝组织胶原纤维的积聚，从而减轻肝脏炎症并逆转纤维化的发生发展过程。