奥拉米特对异烟肼联合利福平所致小鼠肝损伤的治疗作用及其可能机制

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目的:初步探讨奥拉米特(Orazamide)对异烟肼(isoniazid,INH)联合利福平(rifampicin,RFP)所致药物性肝损伤的治疗作用及其可能机制。方法:选取60只SPF级雄性KM小鼠,体重20~22g,按体重随机分为6组(n=10):空白组、模型组、谷胱甘肽组、奥拉米特低、中、高剂量组。除空白组外所有组小鼠均给予异烟肼(75mg/(kg·d))+利福平(75mg/(kg·d))连续灌胃14d,从第15d开始,谷胱甘肽组给予谷胱甘肽78mg/(kg·d),奥拉米特低、中、高剂量组分别给予奥拉米特80mg/(kg·d)、160mg/(kg·d)、320mg/(kg·d)连续灌胃14d,空白组和模型组给予等容量生理盐水灌胃。28d后处死各组小鼠,摘眼球取血,并取肝脏。全自动生化分析仪检测小鼠血清肝功能。HE染色光镜下观察小鼠肝脏组织病理学改变。全自动生化分析仪检测小鼠肝匀浆SOD、GSH-Px活力和MDA含量。ELISA法检测小鼠肝脏匀浆中TNF-α、IL-1β、CYP450酶的水平。PCR法检测小鼠肝脏匀浆Bsep mRNA、Ntcp mRNA的表达水平。结果:(1)血生化结果:对比空白组,模型组TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、TBA水平明显升高(P<0.01);对比模型组,药物治疗组TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、TBA水平明显降低(P<0.01),以高剂量组降低最明显(P<0.01)。(2)HE染色结果:空白组HE染色肝细胞结构及汇管区结构正常;模型组出现肝细胞空泡变性、坏死,汇管区可见胆管扩张、炎症浸润;予以药物治疗后细胞变性坏死、胆管扩张、炎症浸润有不同程度改善,以高剂量组和谷胱甘肽组改善最明显。(3)肝组织生化结果:对比空白组,模型组肝脏匀浆中SOD、GSH-PX含量明显降低(P<0.01),而MDA含量则明显升高(P<0.01);对比模型组,药物治疗组SOD、GSH-Px含量显著升高(P<0.05),MDA含量则明显降低(P<0.05),以谷胱甘肽组SOD、GSH-Px含量降低最明显(P<0.01),以高剂量组MDA含量降低最明显(P<0.01)。(4)ELISA结果:对比空白组,模型组血清TNF-α、IL-1β、CYP450水平明显升高(P<0.01);对比模型组,药物治疗组TNF-α、IL-1β、CYP450酶水平降低(P<0.05),以高剂量组降低最明显(P<0.01)。(5)PCR结果:对比空白组,模型组Bsep和Ntcp mRNA的表达水平明显降低(P<0.01);对比模型组,药物治疗组Bsep和Ntcp mRNA的表达水平明显升高(P<0.05),以高剂量组升高最明显(P<0.01)。结论:1.奥拉米特对异烟肼联合利福平诱导的肝损伤有治疗作用。2.治疗机制可能涉及抑制氧化应激反应、减少炎症因子释放、下调CYP450的表达、促进胆汁酸代谢。
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