植物油脂是食用脂类特别是不饱和脂肪酸的主要来源,而且也是重要的工业原料。随着人口的增加和人民生活水平的提高,我国食用油需求量日益加大,然而国内食用油原料供给严重不足,导致国家食用油安全问题日益突出。因此,研究植物油脂的合成调控机理,为提高油料作物的含油率提供靶基因,具有重要的理论意义和应用价值。近年来,尽管植物油脂代谢合成、代谢相关基因的克隆和转录调控已经取得了较大进展,但对于油脂合成代谢类在转录后水平的调控方式研究较少。CER9基因编码一个可能的E3泛素连接酶,参与表皮蜡质和角质的合成调控。我们最新研究发现CER9基因功能缺失突变体cer9-2种子含油率和Col-0野生型相比相对增加了17%,暗示CER9参与了种子油脂的合成调控。进一步CER9互作蛋白的筛选及验证,发现编码内质网溶血磷脂酰基转移酶LPAT2能够与CER9直接互相作用,LPAT2在种子油脂合成过程中起重要作用,因此猜测CER9可能是通过与LPAT2互作从而影响植物油脂合成的。我们还进行了LPAT2过表达载体构建和转基因株系的获得以及LPAT2 T-DNA插入突变体Salk 04681的鉴定,为进一步分析CER9与LPAT2的遗传关系奠定了基础。另外,本研究还利用原核表达载体获得了CER9泛素化分析所必需的E1、E2、E3 (CER9-RING)和泛素等蛋白,并制备了泛素抗体,为进行CER9 E3泛素连接酶活性及对底物的泛素化分析奠定了基础。