不同活血化瘀方剂对重型颅脑损伤急性期大鼠神经再生修复的干预作用及应用风险

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdfghjkd
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目的动态观察重型颅脑损伤急性期大鼠NSS(Neurological Severity Scores,神经功能缺损评分)、Wnt/β-catenin信号通路、BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor,脑源性神经营养因子)与NGF(Nerve Growth Factor,神经生长因子)的表达规律及活血化瘀方剂对神经再生修复的干预作用。方法306只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、脑蛋白水解物组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组、补阳还五汤组7组,正常组与脑蛋白水解物组每组各18只,模型组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组及补阳还五汤组每组54只。若实验途中大鼠死亡,则随即补上相应大鼠,记录大鼠死亡数。采用改良的Feeney自由落体方法建立重型颅脑损伤大鼠模型;造模成功后脑蛋白水解物组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组、补阳还五汤组分别给予相应药物:1.11mg/200g、2.04 g/200 g、3.12 g/200g、1.92 g/200g、5.74 g/200g灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,各组每日均灌胃1次,连续7天。于伤后6 h灌胃,灌胃后第1、3、7天对各组大鼠进行神经功能缺损评分,采用RT-PCR检测Wnt3a和β-catenin mRNA在海马组织中的含量;免疫组织化学法检测BDNF和NGF蛋白在海马组织中的含量。结果(1)实验期间正常组NSS在均无明显变化。模型组在伤后明显升高(p0.05),桃红四物汤在第3天开始升高,第7天达到峰值(p<0.05);血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤在第3天有所降低,在第7天才开始升高,升高的幅度大于脑蛋白水解物组(p<0.05)。其中,补阳还五汤组的升高幅度最明显,其次是通窍活血汤组。(3)与正常组相比较,模型组β-catenin mRNA的表达在伤后第1天立即明显升高,并随着时间的延长不断升高(p<0.05)。与模型组相比较,脑蛋白水解物组在伤后第1天无明显变化,在伤后第3天开始升高,一直持续至第7天(p<0.05);桃红四物汤组在1~3天下降;血府逐瘀汤组在第1天有所下降(p<0.05),第3天无明显变化;通窍活血汤组随时间的延长逐渐升高(p<0.05);补阳还五汤组在第1~3天无明显改变;4个活血化瘀方剂组β-catenin mRNA的表达在第7天均明显升高(p<0.05)。其中补阳还五汤组的升高幅度最明显,其次是通窍活血汤组,且升高的幅度均大于脑蛋白水解物组。(4)与正常组相比较,模型组BDNF和NGF蛋白的表达在伤后1天立即明显增多,并随时间的延长逐步升高,在伤后3天达到高峰,伤后7天有所下降(p<0.05)。与模型组相比较,脑蛋白水解物组在伤后7天才有所升高(p<0.05),补阳还五汤组和通窍活血汤组在伤后第1天立即升高(p<0.05),桃红四物汤组及血府逐瘀汤组在伤后1天无明显改变,在伤后3天明显降低(p<0.05),之后在第7天升高(p<0.05)。各中药组在用药后第7天时明显升高(p<0.05),升高的幅度均明显高于模型组与脑蛋白水解物组。损伤急性期大鼠的神经再生修复有一定疗效,但作用的强度有所不同,以补阳还五汤和通窍活血汤效果较好。结论桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对重型颅脑目的探讨桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对重型颅脑损伤急性期大鼠的影响。方法306只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、脑蛋白水解物组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组、补阳还五汤组7组。除正常组外其余各组采用改良的Feeney自由落体方法制备重型颅脑损伤大鼠模型。造模成功后脑蛋白水解物组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组、补阳还五汤组分别给予相应药物1.11 mg/200 g、2.04 g/200 g、3.12 g/200 g、1.92 g/200 g、5.74 g/200 g灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,各组每日均灌胃1次,连续7天。灌胃后随时统计大鼠死亡率,在第1、3、7天分别观察大鼠脑组织病理评分,ELISA法检测血清Tau(microtubule-associated protein Tau,微管相关蛋白Tau)、GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein,胶质纤维酸性蛋白)的含量。结果(1)实验期间正常组与脑蛋白水解物组大鼠无死亡,其余各组大鼠死亡主要集中在前4天,前4天正常组比较,模型组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组大鼠死亡率都显著升高(p<0.01);与模型组比较,桃红四物汤组、血府逐瘀汤组大鼠死亡率也明显升高(p0.05)。(2)与正常组同时间相比较,各给药组大鼠脑组织病理评分及血清Tau、GFAP蛋白表达在3个时间段均明显升高(p<0.05)。与模型组同时间比较,第1天血府逐瘀汤组、通窍活血汤组和补阳还五汤组大鼠病理评分升高,桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、补阳还五汤血清GFAP蛋白表达升高(p<0.05);而在第3天除桃红四物汤组外,其余各给药组病理评分较模型组降低;脑蛋白水解物组、通窍活血汤组、补阳还五汤血清Tau、GFAP蛋白表达降低(p<0.05);第7天各给药组病理评分及血清Tau、GFAP蛋白表达均降低(p<0.05)。结论重型颅脑损伤急性期使用活血化瘀方剂会加重病情,增加死亡风险。其中以桃红四物汤及血府逐瘀汤风险最大。用活血化瘀药来治疗重型颅脑损伤急性期的最佳时间段可能在发生损伤第4天后,并且以补阳还五汤和通窍活血汤效果较好。
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