背景：胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤,病死率一直居高不下,严重影响着人们的身心健康,其发病机制目前仍不清楚。肿瘤干细胞已成为肿瘤研究的热点之一,肿瘤干细胞可能在胃癌发生的过程中扮演着重要角色。悬浮培养法分离肿瘤干细胞是研究胃癌干细胞的重要方法。目的：分离和鉴定胃癌干细胞并评价其干细胞特性。方法：将胃癌细胞用含细胞因子EGF、bFGF的无血清培养基悬浮培养分离出富含胃癌干细胞样细胞的肿瘤球,集落形成实验分析肿瘤球形成克隆集落的能力,细胞免疫荧光法鉴定分离的胃癌干细胞,细胞划痕及Transwell检测肿瘤球的迁移及侵袭能力,细胞活力试验测定肿瘤球对顺铂的IC50值。结果：与普通的胃癌细胞相比,富含胃癌干细胞的肿瘤球克隆形成能力强,形成的克隆球数更多。肿瘤球高表达CD44及CD54,但低表达HK-ATPase。细胞划痕实验及Transwell体外迁移实验表明富含胃癌干细胞的肿瘤球迁移能力较普通的胃癌细胞强,差别具有统计学意义(P<0.01)；Transwell体外侵袭实验显示,胃癌干细胞组侵袭细胞数较胃癌细胞组增多,差别具有统计学意义(P<0.05)。细胞活性测定结果显示富含胃癌干细胞的肿瘤球对顺铂化疗的IC50值较胃癌细胞显著增高(P<0.01)。结论：富含胃癌干细胞的肿瘤球具有高的自我更新能力,多向分化能力和较强的迁移和侵袭能力,易对顺铂耐药。