【摘 要】
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本研究对生物农药苏云金芽孢杆菌Btlsz9408进行了气升式发酵,研究了发酵液的离心过滤工艺条件、壳聚糖絮凝浓缩工艺条件、复相乳液法制备Bt杀虫蛋白肠溶微胶囊的最佳工艺条件
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本研究对生物农药苏云金芽孢杆菌Btlsz9408进行了气升式发酵,研究了发酵液的离心过滤工艺条件、壳聚糖絮凝浓缩工艺条件、复相乳液法制备Bt杀虫蛋白肠溶微胶囊的最佳工艺条件、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP)蛋白质微胶囊包裹量的测定方法、杀虫蛋白的非肠溶性微胶囊、肠溶性微胶囊和非肠溶性微胶囊的释放特性等。气升式发酵得到了晶体规则,数量多的发酵原液。离心过滤可以除去发酵原液中的大颗粒物质,有利于后续分离纯化工艺的进行,其最佳工艺条件为在每次处理量1L,温度10-15℃、pH4.5时过滤效果最好。采用壳聚糖进行絮凝浓缩,避免了化学絮凝剂、微生物絮凝剂对原药效果的影响,絮凝浓缩可除去约75%左右的水分及有色物质,其最佳工艺条件为:pH5.0-6.0、温度30-35℃、壳聚糖浓度0.025%、搅拌时间5min、550r/min;通过对发酵液分离纯化,得到等电点沉淀法提取的杀虫蛋白质比有机溶剂法的纯度高。对测定HPMCP蛋白质微胶囊包裹量的方法研究中得到福林-酚法最适合测定。复相乳液法制备的肠溶式微胶囊形态多为圆形,并且没有粘结在一起的现象,最佳工艺条件为:分散质浓度为0.5%,搅拌转速6000r/min、囊壁材料浓度2%-3%、乳化剂用量为5%、芯材量4%、分散比为1:2.5-1:3.5。以乙基纤维素制备的非肠溶性微胶囊形态规则,不粘结在一起,通过对微胶囊释放特性研究得到:体外测定2-3h微胶囊释放量达到平衡,肠溶性微胶囊在偏碱性环境中释放速度快,而非肠溶性微胶囊则不受溶液的酸碱性影响。
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