目 的 肝脏外科手术中大量失血会诱发肝衰甚至死亡。临床上所采用的入肝血流阻断以减少术中失血的方法其本身会因为造成肝脏缺血再灌注损伤而受到限制。另外长期以来国内外对肝细胞再生机制已有广泛研究，肝细胞死亡或缺失会迅速启动肝再生。值得注意的是缺血再灌注损伤程度与术后肝功能恢复有着密切的关系，而肝细胞再生功能提高也是肝功能恢复的重要一环，然而缺血再灌注损伤对肝细胞再生的影响却鲜有报道。随着缺血再灌注研究的深入就必然考虑缺血再灌注损伤与肝再生的关系。以往对缺血再灌注肝损伤研究的目在于增加对残肝细胞的保护，却较少建立针对促进肝再生以对抗肝损伤的思想。目前认为人正常肝脏常温下能耐受60min以上的缺血，新近有研究发现在门静脉转流下正常大鼠常温下能耐受入肝血流阻断的安全时限长达90min。本研究欲通过预先保留门静脉转流肝叶（约占全肝70％），阻断部分肝叶（约占全肝30％）血供，到预定观察终点后从新开放血供灌注缺血肝叶，同时切除门静脉转流肝叶（70％肝切除）这一模型来分析大鼠肝脏缺血再灌注对肝细胞再生功能的影响。方 法 1．动物模型：利用大鼠肝脏解剖特点，用暂时阻断肝右叶、尾叶（约占全肝30％）肝蒂，造成30％肝叶缺血，保留肝左叶、中叶（约占全肝70％）血供作为门静脉回流通道，防止门静脉淤血。到预定观察终点后先恢复肝右、尾叶血供，再切除肝左、中叶（70％肝切除）以诱导肝再生。 一 一 一 ／多一一回一呜气屯、飞＼二一 group SO：——omln lschemla groupN－刀H．口min lschemla group 30’PH ll－－．30min ischemia sroup 60’PH－60min ischcmia glOOp 90’Pll WW 90Olll ISChCml3 二 缺血再灌注损伤与肝再生功能：借助卜述模型通过不同的缺血再灌注时程后，观察肝阻大体形态，组织病理学及超微结构的受化，大鼠7～10天存活率及全肝／体重比恢复情况，术后一．TdR肝纫胞掺入夕CyClinLDI mRNA及蛋白表达，EGFR表达，h沼 TNF、IL－6浓度等主旨付，分别反映和评价该动物模型的肝损伤程度，以及肝细胞再主功能。结 果I 该动物模型结合了肝叶缺血及川％肝切除，缺血可靠，徽乍可行易重复，结果稳定。 2 NPH、30PH、60’PH、90’PHfl大鼠术后48h存汾会分别为100％、100％、70％、60％，术后7天存话率分别为川％、100％、600／6、40Q／6。术后10天存活率与术后7天存活率相同。由此可见大鼠承受缺血丙灌泞及70％肝切除损伤后死亡主要发生在48h以内。 3 正常Wistar大鼠肝脏／体重比为418％左右；N－PH、30’Pll、60’PH、90TH组大鼠术后4天全肝／体重比分别为252％、2500／0、2320／0、189％；术后7天全肝淋重比分别为5卯％、3的％、365％、347％：术后10大全肝／体重比分别为415％、422％、437％、443％。 m 4．肝脏病理变化随着缺血时间延长而加重。缺血期间的病理改变以肝细胞浊肿为主；再灌注0～12h则以肝窦淤血、点状溶解坏死为主；再灌注 12～24h病理改变逐渐过渡为以大量中性粒细胞、淋巴细胞浸润及弥漫性肝细胞片状坏死为主；7～10天则表现为仍有大量的中性粒细胞。淋巴细胞浸润的坏死组织被增生的纤维组织紧密包裹，包裹以外的肝组织有轻度的纤维组织增生。以肝细胞核分裂相为特点的肝细胞增殖变化随着缺血时间延长而减少。正常70％肝切除诱导的细胞核分裂相在24～48h逐渐增多，于48h达峰值。NIH、30’PH、60’FH、90’IH组大鼠术后48h细胞核分裂相计数分别为43．6 f4．9个门 高倍视野卜 倍X44、l上3、4个八 高倍视野（40X10倍）、22．7士27个门 高倍视野（40X10倍）、194士3．4个门 高倍视野（40。10倍）。 5 大鼠术后24h3H1dR掺入率随着缺血时间的延长而显著降低。 6 大鼠术后 12h CyclinD；mRNA及此后相应的蛋白表达水平随着缺血时间的延长而显著降低。 7、大鼠术后 12h内 EGFR蛋白表达水平随着缺血时间的延长而显著降低。 8．各组大鼠术后6h内TNF浓度均不同程度地升高，缺血时间越长组升高越显著，且24h内持续处于相对高位，下降趋势不明显。 9 各组大鼠术后6h内IL七浓度均不同程度地升高，缺血时间越长组升高越不显著，且24h内持续处于相对低位，升高趋势不明显。结 论： l本研究采用了一种大鼠30％肝叶承受缺血再灌注损伤，同时70％肝叶转流后再切除的动物模型，既模拟无门静脉淤血的单纯肝叶缺血再灌注，同时结合以70％肝切除的经典途径诱导肝再生，是研究缺血再灌注对肝再生功能影响较好的模型。 2．大鼠肝脏缺血30ndn?