电针治疗LDH疗效与MRI评分的相关性及其抑制有髓神经纤维内向生长的机制研究

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目的
  1.研究电针治疗腰椎间盘突出症的临床疗效(ODI指数改善情况)与责任病灶MRI表现的相关性,为LDH的诊疗及预后评估提供更为精准的依据。2.明确Netrin-1在电针抑制退变椎间盘有髓神经纤维内向生长中所起的关键作用,阐明电针治疗退变性腰椎间盘疾病的可能机制。
  方法
  1.临床研究:选取60例符合要求的LDH患者纳入临床研究,参照1980年形成的Oswestry功能障碍指数问卷表(oswestry disability Index, ODI)对患者治疗前的症状、体征进行评分,并收集患者责任病灶腰椎MRI检查的影像数据以计算MRI评分。完成2个电针疗程后,再对患者进行治疗后的ODI评分,并计算出治疗改善指数和改善率。最后将电针治疗后的ODI指数改善率、改善指数分别与MRI评分进行相关性分析。
  2.实验研究:①研究电针对新西兰模型兔退变腰椎间盘所对应神经根(DRG)中Netrin-1表达的影响:将实验兔随机分为5小组,正常组、假模型组、模型组、模型+电针组、模型+假电针组,每组4只,各组分别在处理和治疗完后,将其加压装置拆除,并拔出克氏针,行L4-5椎间盘MRI平扫,之后取出椎间盘相应DRG,采用Westernblot方法检测Netrin-1在支配椎间盘的相应DRG中的表达。②研究上调和下调DRGNetrin-1表达对电针抑制退变椎间盘有髓神经纤维内向生长的影响:针对新西兰兔Netrin-1基因构建慢病毒载体,注射入正常新西兰兔L2DRG,采用Westernblot方法证实过表达上调和抑制表达下调Netrin-1成功后,再行椎间盘退变造模以及电针治疗,疗程结束后处死取出椎间盘相应DRG,运用HE染色方法观察电针对兔退变腰椎间盘模型DRG神经纤维生长的影响。从正反两方面观察研究,从而判断Netrin-1是否参与电针抑制椎间盘有髓神经纤维内向生长的效应。
  结果
  1.临床研究:统计结果显示,电针治疗腰椎间盘突出症患者的ODI改善率与MRI评分之间有相关性,且呈高度正相关的直线关系(r=0.830);同时,ODI改善指数与MRI评分之间也具有相关性,且呈高度负相关的直线关系(r=-0.848)。
  2.实验研究:WB结果:①模型组经过压力诱导退变的椎间盘相应节段DRG中,与正常组和假模型组对比,Netrin-1蛋白含量减低,表达下降(P<0.05);模型+电针组与模型组比较,电针28天能上调Netrin-1蛋白的表达水平(P<0.05),但是在假电针组中未见上调的Netrin-1表达(P<0.05)。②正常组与乱序对照组Netrin-1表达无明显差异(NS);与正常组对比,过表达组中Netrin-1表达明显增高(P<0.05),抑制表达组Netrin-1表达受到抑制(P<0.05)。HE染色结果:模型组和模型+乱序对照组与正常组相比,可见细胞核皱缩伴有偏移,细胞质水肿,形态增大,轴突消亡,髓鞘分解,神经纤维排列紊乱;模型+电针组与模型组相比,神经纤维的紊乱程度较模型组有所减轻;模型+上调Netrin-1组中未见明显的细胞水肿,与模型组相比,神经纤维排列相对整齐,与模型+电针组相比,形态学和组织学表现差异不大;模型+下调Netrin-1+电针组,与模型+电针组相比,可见细胞核明显皱缩,细胞核中心向外周偏移,细胞核周围染色质溶解,轴突消亡,髓鞘分解,神经纤维排列紊乱,卫星细胞聚集。
  结论
  1.临床研究:电针治疗腰椎间盘突出症患者的ODI指数改善率、改善指数分别与责任病灶MRI评分呈高度正相关和高度负相关的直线关系。责任病灶MRI评分越高即MRI的表现越轻,可能提示电针治疗的临床疗效越好,而疗效改善指数波动越小,电针治疗效果越稳定。
  2.实验研究:电针能上调Netrin-1蛋白的表达,抑制椎间盘有髓神经纤维内向生长;采用髓鞘注射的方法上调DRGNetrin-1的表达,能模拟电针的作用,从而抑制有髓神经纤维内向生长;下调DRGNetrin-1表达能翻转电针抑制退变椎间盘有髓神经纤维内向生长的作用。从正、反两方面阐明了Netrin-1在电针抑制椎间盘有髓神经纤维内向生长中所起的关键作用。
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