目的 通过观察小鼠肾小体的发生与发育、肾小体数目的改变、肾小体各组成细胞的超微结构变化、细胞增殖与凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,研究小鼠肾小体发生和发育过程中肾小体体积增长曲线、各种细胞的形态学改变以及细胞增殖与凋亡的变化规律,探讨增殖与凋亡两者之间的关系及其在小鼠肾小体正常发育过程中的作用。 材料和方法 中国昆明小白鼠(锦州医学院实验动物中心提供),雌、雄3:1同窝饲养,以观察到雌鼠阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0天(E0d)。孕鼠分笼饲养2周后,每日早8时、晚5时观察生产情况,以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0天(N0d)。选取胚龄10天、12天、14天、16天、18天的胎鼠和生后1天、3天、7天、10天、14天、21天、40天的仔鼠肾脏,采用Fractionator方法,以0.825mm间距排刀横向截切全肾呈薄片状,10%甲醛溶液固定48小时后,微量排水法测肾脏体积。应用光镜技术结合体视学分析方法对不同胚龄和生后日龄的发育不同阶段的小鼠肾小体进行系统观察和体视学测量;应用组织培养、后肾移植和光镜、电镜技术对发育不同阶段的肾小体各组成成分的形态学变化进行系统观察;应用PCNA免疫组织化学方法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL染色法)结合光镜电镜技术,对发育不同阶段肾小体的细胞增殖和凋亡及Bcl-2和Bax基因的表达进行观察和分析。