背景和目的随着整形行业的兴起,一次简单的脂肪抽吸量,可以从中获得大量的脂肪源性干细胞,同时,脂肪源性干细胞的研究不牵涉伦理问题。继胚胎干细胞后,作为成体干细胞,脂肪源性干细胞有望成为组织工程的种子细胞。传统的获得脂肪源性干细胞的方法是胰酶消化法,不过此方法费时、低效,不能够满足基础研究和临床应用研究对脂肪源性干细胞的大量需求,因此急需一种快速、高效的分离培养脂肪源性干细胞的方法。方法麻醉SD大鼠,于无菌条件下切取大鼠双侧腹股沟的脂肪组织,采用组织块培养法,获得脂肪源性干细胞,应用CCK-8检测脂肪源性干细胞的细胞增殖活性,采用流式细胞仪检测脂肪源性干细胞表面标志物的阳性率。诱导脂肪源性干细胞向成骨细胞、成脂细胞和内皮祖细胞的分化,并对这几种细胞进行表面标志物的鉴定。结果组织块培养法可得到脂肪源性干细胞,且易在体外进行扩增;传代后的脂肪源性干细胞以长梭形细胞为主,呈漩涡状排列,细胞生长迅速,细胞形态及特性稳定,可稳定传至数十代,细胞生长曲线呈抛物线形;流式细胞仪检测细胞表面标志CD44、CD90、CD29呈阳性表达,CD45及CD31呈阴性表达;成脂诱导培养能够得到的脂肪细胞,油红素O染色阳性;成骨诱导培养能够得到成骨细胞,细胞茜素红染色阳性;脂肪源性干细胞向内皮祖细胞诱导分化能够得到内皮祖细胞,细胞表面标志物CD31、CD34、CD133、KDR检测阳性,Di I-ac-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色阳性。结论通过组织块培养法可以成功分离得到脂肪源性干细胞,细胞纯度较高,且易于扩增培养,能高表达干细胞的细胞表面标记物,同时具有向骨细胞、脂肪细胞及内皮祖细胞的多向分化潜能,能充分满足组织工程种子细胞的需求。