【摘 要】
：
目的:抽动症是一种常见的神经精神疾病,主要症状为多种运动抽动和发声抽动。大量研究发现,皮层—纹状体—丘脑—皮层通路的异常是抽动症的主要病理基础,黑质纹状体多巴胺系统功能亢进是其主要原因。针刺治疗抽动症疗效显著,但其机制尚未明确。本论文研究针刺治疗抽动症的机制,首先观察针刺对抽动症模型小鼠抽动行为的影响,探讨脑内多巴胺系统是否参与针刺治疗抽动症的神经生物学机制。然后,探索化学遗传兴奋或抑制背侧纹状体
论文部分内容阅读
目的:抽动症是一种常见的神经精神疾病,主要症状为多种运动抽动和发声抽动。大量研究发现,皮层—纹状体—丘脑—皮层通路的异常是抽动症的主要病理基础,黑质纹状体多巴胺系统功能亢进是其主要原因。针刺治疗抽动症疗效显著,但其机制尚未明确。本论文研究针刺治疗抽动症的机制,首先观察针刺对抽动症模型小鼠抽动行为的影响,探讨脑内多巴胺系统是否参与针刺治疗抽动症的神经生物学机制。然后,探索化学遗传兴奋或抑制背侧纹状体、黑质致密部中表达多巴胺D1、D2受体的神经元,对小鼠抽动行为的影响,观察其能否模拟针刺作用。继而观察手针及不同频率的电针对抽动症转基因模型小鼠抽动行为的影响,筛选出针刺治疗抽动症的最佳治疗方案。最后,观察针刺对黑质纹状体中内源性大麻素CB1受体的调节作用,进一步探讨CB1受体是否参与针刺调控脑内多巴胺系统从而治疗抽动症的机制。本研究不仅有助于阐明针刺治疗抽动症的神经生物学机制,也有助于针刺治疗抽动症的临床推广和应用。方法:（1）药物诱导抽动症模型小鼠是在Balb/c背景的野生型小鼠和C57BL/6背景的D1Rcre、D2R-cre、CB1R flox小鼠腹腔注射3,3’-氨基二丙腈（3,3’-Iminodipropionitrile,IDPN）7天来诱导抽动症模型。抽动症转基因模型小鼠（D1CT-7小鼠）无需造模,饲养至3周即出现抽动症表型。（2）采用化学遗传学策略,将兴奋性化学遗传病毒、抑制性化学遗传病毒、空载对照病毒,通过脑立体定位仪分别微量注射到D1R-cre小鼠、D2R-cre小鼠、同窝野生小鼠的双侧背侧纹状体或黑质致密部,以化学遗传兴奋或抑制表达D1R或D2R的神经元。（3）采用手针、2Hz低频电针、100Hz高频电针和假针刺治疗,穴位选用“百会”和“印堂”穴,以筛选针刺治疗抽动症的最佳治疗方案。（4）将逆行TH-cre病毒微量注射到CB1R flox小鼠及其同窝野生对照小鼠的双侧背侧纹状体,以选择性敲除DA能神经元上的CB1受体。（5）采用抽动刻板行为测试、疲劳转棒测试、前肢抓力测试和旷场测试评估各组小鼠的抽动相关行为。（6）采用荧光分光光度法检测背侧纹状体、黑质致密部、前额叶皮层和丘脑的多巴胺含量。（7）采用Western blot方法检测纹状体、黑质致密部、前额叶皮层和丘脑的多巴胺D1、D2受体和酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase,TH）表达,检测背侧纹状体、黑质致密部的CB1受体表达。（8）采用免疫荧光组织化学技术标记纹状体、黑质致密部、前额叶皮层和丘脑的多巴胺D1、D2受体阳性神经元和TH阳性多巴胺能神经元,检测化学遗传病毒与D1、D2受体的共标情况,检测黑质致密部TH阳性神经元和星型胶质细胞（GFAP阳性）上CB1受体的表达,判断DA能神经元上CB1受体是否被选择性敲除。结果:（1）针刺降低了纹状体、黑质致密部和前额叶皮层中多巴胺的含量,但没有影响丘脑中多巴胺的含量。针刺下调了纹状体和黑质致密部中D1、D2受体以及黑质致密部中TH的表达,同时也下调了前额叶皮层中D1受体的表达。针刺未影响前额叶皮层中D2受体和丘脑中D1、D2受体的表达。（2）化学遗传抑制背侧纹状体表达D1或D2受体的神经元后,抽动症模型小鼠的抽动刻板症状减轻;化学遗传兴奋背侧纹状体表达D1受体的神经元后,溶媒对照组小鼠的抽动刻板症状加重,但未影响抽动症模型小鼠的抽动刻板症状;化学遗传兴奋背侧纹状体表达D2受体的神经元对各组小鼠的抽动刻板症状无影响。（3）化学遗传抑制黑质致密部表达D1或D2受体的神经元后,抽动症模型小鼠的抽动刻板症状减轻;化学遗传兴奋黑质致密部表达D1或D2受体的神经元对各组小鼠的抽动刻板症状无影响。（4）手针和低频电针而非高频电针减轻了D1CT-7小鼠的抽动刻板症状,减少了其在旷场中的活动,对前肢肌力无影响。（5）手针和低频电针增加了抽动症模型小鼠黑质致密部中TH阳性神经元上CB1受体的表达,降低了背侧纹状体和黑质致密部中多巴胺的含量。特异性敲除投射到背侧纹状体的黑质致密部的多巴胺能神经末梢上的CB1受体后,手针和低频电针对抽动症模型小鼠的抽动刻板症状和背侧纹状体、黑质致密部中多巴胺的含量无明显影响。结论:（1）针刺可通过上调背侧纹状体和黑质致密部中的CB1受体,抑制多巴胺的合成和释放,从而降低黑质纹状体中多巴胺的含量及其D1、D2受体的表达,来减轻抽动症模型小鼠的抽动刻板症状,为针刺治疗抽动症提供了理论基础。（2）本研究发现手针和低频电针均能减轻抽动症模型小鼠的抽动刻板症状,而高频电针没有疗效,为临床上针刺治疗抽动症提供优化的治疗方案。（3）抑制背侧纹状体或黑质致密部表达D1或D2受体的神经元后,模拟了针刺治疗抽动症的作用,减轻了抽动症模型小鼠的抽动刻板症状,为抽动症的治疗提供了新的靶点。
其他文献
研究背景视网膜缺血-再灌注（retinal ischemia-reperfusion,retinal I/R）模型造成的视网膜I/R损伤,可引起视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）凋亡和血管损害。明显的RGCs凋亡发生在I/R损伤2天后,血管损害则可出现在损伤后不同阶段。例如,I/R损伤2天内出现视网膜血管通透性增加、血管周围炎症细胞浸润及内皮依赖性舒张功能受
精密重力测量在地球物理、基础科学研究、资源勘探等领域都发挥着重要的作用。冷原子干涉重力仪作为测量绝对重力值的高精度仪器,受到国内外多个研究小组的广泛关注。其中原子团温度是冷原子干涉重力仪的重要参数,由温度引入的原子团扩散效应不仅会限制仪器灵敏度,还会贡献系统误差,影响测量的准确度。制备超冷原子是解决上述问题的有效途径之一:一方面可以改善原子干涉仪的条纹对比度,提高仪器灵敏度,另一方面也有助于研究和
功能梯度纳米增强复合材料是一种极具潜力的新型轻质高强度材料,且可设计性强、环境适应性好,在航空航天、高速列车、汽车等领域应用前景广阔。随着工程材料/结构逐渐向着超轻量化、功能特殊化、性能集成化的方向发展,对新材料的振声等综合性能需求日益提升。研究功能梯度纳米增强材料/结构的振声特性对其振声理论发展和工程应用均具有重要意义,而目前对该材料/结构的振声特性,特别是在力、热、声等复杂载荷下的振声研究报道
随着微电子集成技术的高速发展,电子器件单位体积的功率越来越高,导致电子器件的散热问题日益严重,逐渐成为制约其技术发展的关键问题。在微电子器件散热方面,微尺度沸腾换热及其强化技术以及相关换热元件的优化研究近年来受到各国传热界学者的广泛关注。有关沸腾、冷凝等相变换热的实验研究层出不穷,但理论和模拟的研究难以有所突破,从目前理论和模拟方面的研究来看,尽管单相对流换热的计算方法已经十分成熟,但一旦涉及到两
近年来,物联网,云计算、大数据和人工智能等技术的发展给制造业带来巨大进步,大幅提升了制造过程的生产效率。智能机床作为制造业中用于执行的基础装备,在整个生产过程中扮演着重要的角色。刀具是“智能机床的牙齿”,其性能直接影响到工件表面质量以及加工工件的性能。刀具刃口与工件之间不可避免的摩擦,使得刀具磨损成为影响制造过程可靠性和稳定性的关键因素。因此,实时准确地评估刀具磨损状态,不仅可以降低生产成本,而且
金属卤化物钙钛矿材料由于其优异的光电特性和可溶液法制备的特点,引起了科研工作者们的广泛关注。经过十余年的发展,基于这类材料制备的钙钛矿太阳能电池（Perovskite Solar Cells,PSCs）实验室公证效率已经达到了25.5%。然而,材料及器件稳定性等问题仍然制约着PSCs的产业化推进。基于Ti O2/Zr O2/Carbon三层介孔膜结构的可印刷PSCs,具有成本低廉、制备工艺简单以及
永磁同步电机具有高转矩密度、高功率密度、高效率和宽转速运行区间等优点,被广泛应用于工业生产、交通运输、航空航天和国防军工等领域。模型预测控制,其概念直观、设计灵活、动态响应快、能系统处理约束条件,在永磁同步电机的高性能控制中具备显著优势,有着良好的应用前景。但永磁同步电机模型预测控制策略仍不够完善,解决其参数鲁棒性较差、成本函数中权重系数设计较为复杂、稳态脉动较大等问题,对于提高系统的可靠性、算法
微生物是生物地球化学循环中不可缺少的组成部分,在平衡生态系统、调节动植物新陈代谢、预防疾病等方面具有重要功能。测序技术的快速发展积累了大量的微生物全基因组和宏基因组数据,为研究微生物遗传多样性、动态变化、环境适应性等提供了丰富资源,推动了微生物基因组的研究由个体基因组转向物种泛基因组和群落宏基因组。微生物泛基因组是一个微生物类群中的所有基因的集合。泛基因组分析可以揭示微生物物种水平的基因组异质性和
锂电池作为最成功的电化学储能器件,被广泛应用于新能源汽车、移动电子产品、电网储能等领域,是可持续发展社会中至关重要的一环。锂电池性能的提高,离不开人们对电池工作机制与老化机制的深入研究。然而,商用锂电池通常具有封闭式结构,其保护性外包装能阻碍可见光、红外线、电子束等表征信息载体的透过。这使得锂电池内部结构变化无损表征困难。目前,学术界缺乏有效手段对商用锂电池内部电解液浸润、气体生成、锂枝晶生长、界
硅材料被认为是极具发展前景的下一代锂离子电池负极材料,其具有较低的工作电位、丰富的材料来源,特别是高达3579 m Ah/g的理论比容量。但是在电池充放电循环过程中锂离子在硅材料中的反复嵌入/脱出会引起负极体积的剧烈变化,由此造成了硅负极结构破裂失效和固体电解液界面膜（SEI膜）反复再生等一系列问题,进而导致了硅负极较低的库伦效率,不可逆的容量衰减和循环寿命的减少,极大限制了硅负极材料的实际应用。