【摘 要】
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食物过敏是生活中经常遇到的一种过敏性疾病,对人们的日常生活产生了很大的影响。其中花生过敏是主要的一种。2008年,儿童中花生过敏的发病率已经达到了1.4%,且在逐年上升。很多食物过敏会随年龄的增加而消退,但是花生过敏不会。引起花生过敏的过敏原蛋白有很多种,其中最主要的也是研究较多的是花生抗原1、2和3(Ara h1、Ara h2和Ara h3)。在健康人体内,免疫系统对非过敏原的食物保持一种非响应
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食物过敏是生活中经常遇到的一种过敏性疾病,对人们的日常生活产生了很大的影响。其中花生过敏是主要的一种。2008年,儿童中花生过敏的发病率已经达到了1.4%,且在逐年上升。很多食物过敏会随年龄的增加而消退,但是花生过敏不会。引起花生过敏的过敏原蛋白有很多种,其中最主要的也是研究较多的是花生抗原1、2和3(Ara h1、Ara h2和Ara h3)。在健康人体内,免疫系统对非过敏原的食物保持一种非响应状态,而在食物过敏的个体内,食物过敏原会敏化而导致其对普通食物产生不适当的炎症响应。食物过敏属于Ig E介导的Ⅰ型超敏反应,这种过敏反应是过敏原和Ig E及高亲和性FcεRⅠ受体相互作用,使肥大细胞脱颗粒,释放出导致过敏性疾病的生物化学物质。实验计划通过解析花生抗原和Ig E抗体的复合结构,从结构的角度上说明他们的相互作用。另一方面,通过使用Ig G4抗体和突变的高亲和性Ig E抗体竞争性阻断过敏过程,从而达到治疗的效果。本实验首先采用点突变的方法,构建了对Ara h3亲和力更高但是对Ara h2亲和力降低不明显的单链Ig E突变抗体,然后通过全基因合成的方法构建了单链Ig G4抗体和花生抗原Ara h3重组载体。之后将这三种蛋白以包涵体的形式表达出来,得到包涵体之后再通过复性、透析得到了足量的蛋白,然后再经过亲和层析和离子交换层析纯化出性状不错的蛋白,最后将抗原和抗体一起孵育得到复合蛋白并筛选了一些结晶条件。最后计划经过晶体筛选得到复合蛋白晶体,并通过X射线衍射的方式解析其结构,得知其相互作用的方式,以解释花生过敏的机制并为花生过敏的治疗提供帮助。
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