HIV相关神经病理性疼痛（HIV-induced neuropathic pain,HNP）是艾滋病常见并发症,其主要诱因是HIV包膜糖蛋白gp120。课题组前期研究发现,TLR2介导gp120诱导的HNP模型小鼠脊髓小胶质细胞激活并参与其机械异常性疼痛的发生。但TLR2参与gp120激活小胶质细胞的具体分子机制尚不明确,因此,本课题拟在体外建立gp120诱导的小胶质细胞损伤模型,进一步研究TLR2在gp120激活小胶质细胞中的作用及分子机制。首先,为确定gp120最佳使用浓度,本实验通过CCK8分析BV2细胞的存活率。用5 ng/m L、10 ng/m L、20 ng/m L和40 ng/m L的gp120处理BV2细胞12 h,发现BV2细胞存活率分别为95.2%、83.2%、85.6%、89.4%。由于10 ng/m L、20 ng/m L和40 ng/m L组细胞存活率无显著差异性。因此,后续选择10 ng/m L的gp120进行实验。其次,为了研究gp120对小胶质细胞激活及其功能的影响,在gp120处理小胶质细胞后,通过显微镜观察、免疫印迹、细胞免疫荧光和流式细胞术实验,从形态、蛋白表达等方面分析小胶质细胞的激活、极化和细胞因子表达变化。结果显示:（1）gp120引起活化的小胶质细胞数量增多并上调其激活标志物CD11b表达;（2）gp120使小胶质细胞CD68表达上调,同时抑制CD206的表达;（3）gp120引起BV2细胞中促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达上调,但抑制了抗炎细胞因子IL-4和IL-10表达。然后,WB分析gp120处理1 h、3 h、6 h、12 h和24 h后的BV2细胞中TLR2的表达。结果表明,gp120引起BV2细胞TLR2表达增加,12 h时TLR2表达量达到峰值,为对照组6.3倍。为进一步确认TLR2在gp120激活BV2细胞过程中的作用,利用si TLR2技术处理BV2细胞制备TLR2-KO细胞进行研究,结果表明:正常BV2细胞中细胞因子（IL-1β、TNF-α、IL-4和IL-10）的表达受TLR2调控;gp120处理后,TLR2介导BV2细胞的激活、极化和细胞因子（IL-1β、TNF-α和IL-4）的表达变化,说明gp120通过TLR2影响BV2细胞的激活、极化和细胞因子表达。最后,为明确TLR2在gp120激活BV2细胞中分子机制,针对小胶质细胞TLR2上下游信号通路进行研究。结果发现,p38 MAPK、JNK、ERK和NF-κB信号通路都参与gp120激活BV2细胞,并且NF-κB信号通路在这一过程中起最关键的作用。然后用PDTC抑制BV2细胞NF-κB信号通路的活性,探究该信号通路对TLR2表达和BV2细胞功能的影响。结果表明,NF-κB信号通路介导TLR2和抗炎细胞因子（IL-4和TGF-β）的表达,PDTC抑制gp120引起的BV2细胞IL-1β和TNF-α表达上调,分别下降26.4%和30%。综上所述,本研究初步明确TLR2介导gp120引起的小胶质细胞激活,gp120使BV2细胞NF-κB信号通路活化引起TLR2表达增加,并通过其下游的p38MAPK、JNK和ERK信号通路,增加相关促炎细胞因子的表达,减少相关抗炎细胞因子的表达,引发炎症反应,最终导致BV2细胞激活并向M1型分化,本研究为开发相关靶向TLR2新药以治疗HNP提供理论基础。