【摘 要】
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目的研究氯喹抑制梓醇对人胃癌AGS细胞自噬的作用后对梓醇促进胃癌细胞凋亡能力的影响。方法分别使用10、20、40、80、160μmol/L浓度的梓醇处理AGS细胞24h,采用CCK-8法观察梓醇（Catalpol）对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用;Western blot检测梓醇对自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和ATG12蛋白表达的影响;Western blot法检测梓醇与自噬抑制剂氯喹（C
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目的研究氯喹抑制梓醇对人胃癌AGS细胞自噬的作用后对梓醇促进胃癌细胞凋亡能力的影响。方法分别使用10、20、40、80、160μmol/L浓度的梓醇处理AGS细胞24h,采用CCK-8法观察梓醇（Catalpol）对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用;Western blot检测梓醇对自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和ATG12蛋白表达的影响;Western blot法检测梓醇与自噬抑制剂氯喹（Chloroquine,CQ）合用后对自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和ATG12蛋白表达的影响及对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的影响;Transwell和划痕实验检测梓醇与氯喹合用后胃癌细胞的迁移能力;Hoechst33342染色和流式细胞术分析梓醇与氯喹合用后胃癌细胞的凋亡情况;ROS生成量检测与梓醇与氯喹合用后胃癌细胞活性氧的生成情况。结果CCK-8结果显示,梓醇可以明显抑制胃癌细胞的增殖,并且呈剂量依赖性（P<0.05）。Western blot结果显示,随着梓醇浓度的增加,自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和ATG12蛋白的表达均呈剂量依赖性增高（P<0.05）,提示梓醇可以促进人胃癌细胞自噬的发生;梓醇与氯喹联合使用可以使自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和ATG12蛋白表达量下降,进一步验证了梓醇对能够促进胃癌细胞的细胞自噬且氯喹能够抑制梓醇对胃癌细胞的促自噬能力;凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2蛋白表达结果显示,抑制梓醇对胃癌细胞的自噬作用后,能够更好的抑制胃癌细胞的生长。Transwell和划痕实验结果表明抑制梓醇对胃癌细胞的自噬作用后能够更好的抑制胃癌细胞的迁移能力。Hoechst33342染色和流式细胞术分析结果表明梓醇抑制胃癌细胞癌的自噬作用后,梓醇促进胃癌细胞凋亡的能力增强。ROS生成量检测结果表明,抑制梓醇对胃癌细胞的自噬作用后,ROS的生成量增加,从而能够增强梓醇促进胃癌细胞凋亡的能力。结论抑制梓醇对胃癌细胞的引起的自噬作用能够增加胃癌细胞的凋亡并且抑制胃癌细胞的增殖。
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