研究背景:甲基苯丙胺（methamphetamine,METH）,俗称“冰毒”,与儿茶酚胺类神经递质结构极其相似,是一种新型苯丙胺类精神兴奋剂,对全身各个组织器官均有毒性作用,研究较多的为METH的神经毒性和心血管毒性。肺动脉高压是以肺动脉阻力的进行性升高为特点,导致患者右心后负荷的增加,最终因右心衰竭而死亡的一种恶性程度极高的进行性疾病。其主要的病理特征为肺小动脉的血管痉挛、肺动脉内膜的增生以及血管重构。目前许多研究表明长期滥用METH与肺动脉高压的发生有密切联系,但分子作用机制还不清楚。目的和意义:本研究主要讨论METH致肺动脉高压动物模型的建立方法,初步探讨STIM1在METH致肺动脉高压中的作用机制。旨在为METH致肺动脉高压的研究提供合适的动物模型,以及为其相关的分子调控机制及其治疗靶点的研究提供理论基础。方法:搜集长期吸食METH者肺组织标本,利用HE、马松染色观察肺组织的病理学改变,免疫组化、免疫荧光检测STIM1分子的表达情况。建立METH致肺动脉高压的动物模型,利用Masson染色、HE染色观察肺动脉组织病理学改变。体外METH（大鼠肺动脉原代培养细胞）中毒模型构建,通过细胞生长曲线、Western Blot、免疫组化和免疫荧光等实验技术检测METH处理后平滑肌细胞表型转换、增殖以及STIM1的表达情况。抑制STIM1表达后,检测肺动脉平滑肌细胞表型转换、增殖相关分子和信号通路蛋白变化情况。研究METH暴露于肺动脉平滑肌细胞后,对肺血管平滑肌细胞收缩、增殖以及迁移的影响。结果:1.长期吸食METH者肺组织血管中膜层可见明显的增厚,肺血管出现重构。2.利用METH长期作用成功诱导出小鼠肺动脉高压模型。3.体外肺动脉平滑肌细胞染毒模型中,细胞生长曲线测定表明染毒细胞增殖、迁移能力明显增强,a-SMA、SM22a表达明显下调,PCNA的表达量明显增加。4.METH处理后STIM1表达明显上调,抑制STIM1/Orai1表达后,细胞内钙离子超载相应受到抑制,肺动脉平滑肌细胞可由合成型恢复成收缩型,增殖能力下降,表明STIM1可以通过Orai1途径调节肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度参与METH诱导的肺动脉重构。结论:METH可诱导小鼠发生肺动脉高压,STIM1在METH诱导的肺动脉高压中发挥重要作用,METH暴露导致STIM1寡聚化,内质网向细胞膜迁移并激活Orai1通道导致细胞钙离子内流,进而引起细胞内钙离子紊乱,导致肺血管平滑肌细胞表型转换,增殖能力提高。