目的肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）因其较高的恶性程度、发病率及死亡率均严重威胁着人类的健康。对于晚期HCC患者,靶向治疗是一种极其重要的手段,而索拉菲尼（Sorafenib）作为HCC靶向治疗中为数不多的多靶点药物,广泛应用于晚期HCC的一线治疗中,可通过抑制RAF/MEK/ERK信号传导通路及VEGF和血小板因子（PDGF）受体,影响肿瘤细胞的生长。然而,索拉菲尼在临床中存在较高的耐药性,其原因尚待明确,有报道称可能与自噬、缺氧等应激条件有关。内质网应激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）作为细胞中常见的应激反应,适当的ERS可起到保护作用,极端ERS亦可独立诱导细胞凋亡。HCC患者主要由病毒性肝炎酒精性肝病发展而来,病毒感染、供血不足等生理环境易诱发肝细胞产生内质网应激;而在HCC患者的肝癌细胞生物学行为活跃,能量缺乏、氧化应激和Ca2+稳态缺失同样加剧了内质网应激。这一过程或许参与了药物耐药性的出现。NAT10全称N-Acetyltransferase 10,位于11号染色体上p13区,其编码的蛋白质是目前唯一同时具有乙酰化酶结构域和RNA结合结构域的蛋白,被认为是RNA ac4C修饰酶,参与了组蛋白乙酰化、t RNA乙酰化及18S r RNA的生物合成等过程。后续研究发现,NAT10可能通过影响m RNA ac4C修饰发挥癌基因的作用,但其具体作用机制尚不清楚。本研究旨在分析NAT10基因在ERS的HCC细胞中的表达量,同时对比si-RNA及Remodelin对ERS的HCC细胞中NAT10基因的抑制情况,并使用流式细胞术检查实验组与对照组经索拉菲尼处理后的细胞凋亡情况,以评估ERS的HCC对索拉菲尼治疗的敏感性。方法1.调取本院HCC确诊患者组织蜡块,完善免疫组化,了解NAT10表达率;2.在肝癌细胞株Hep G2与Huh7内加入衣霉素（Tunicamycin,TM）,蛋白印迹法观察GRP78表达情况,明确细胞是否诱发ERS;3.将肝癌细胞株Hep G2与Huh7各自分为6组,以第一组为对照组,后五组分别加入TM,浓度依次为0.3125、0.625、1.25、2.5、5μM进行培养,再选择内参基因GAPDH及β-actin作为对照,使用蛋白印迹法检测NAT10基因表达情况;4.对经ERS处理后的肝癌细胞株Hep G2与Huh7,分别加入si-RNA,使用蛋白印迹法检测NAT10基因表达是否被抑制,并重复实验选取最优片段;5.通过前期实验及本次蛋白免疫印迹实验,将细胞实验分为实验组与对照组,实验组为Remodelin组和si-NAT10组,对照组为Control组和si-NC组,在已通过TM诱导处于ERS状态的肝癌细胞株Hep G2和Huh7中,分别利用si-RNA敲除或Remodelin抑制NAT10表达,再加入索拉菲尼处理,利用流式细胞术检测肝癌细胞凋亡;6.记录上述实验结果,统计学分析利用SPSS 25.0软件进行,并使用Graphpad等软件绘制图表。结果1.经免疫组化检测,HCC组织中NAT10表达率为87.1%;2.经蛋白印迹实验检测,TM能有效诱发HCC细胞出现ERS,在经ERS处理后的肝癌细胞株Hep G2与Huh7中,NAT10基因的表达量显著提高,使用特异性抑制剂Remodelin或者si-RNA能有效抑制NAT10表达（P＜0.05）;3.经流式细胞术检测,在Hep G2细胞中,control组、Remodelin组、si-NC组、si-NAT10组的细胞凋亡率分别为11.79%、51.37%、12.63%、29.32%;在Huh7细胞中,control组、Remodelin组、si-NC组、si-NAT10组的细胞凋亡率分别为13.38%、38.71%、25.68%、32.74%,细胞对索拉非尼的敏感性增加（P＜0.05）。结论1.在选取的肝细胞癌组织中,免疫组化提示NAT10显示出较高的阳性表达率（87.1%）;2.在发生内质网应激的肝细胞癌中,NAT10基因表达显著上调;3.在发生内质网应激的肝细胞癌中,通过抑制NAT10基因的表达,可增强肝癌细胞对索拉菲尼的敏感性,导致索拉菲尼介导HCC细胞的凋亡率上升。