微管相关蛋白tau与朊蛋白PrP相互作用的研究

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Prion疾病是一组神经退行性疾病,包括人类CJD、GSS、FFI和Kuru病,动物的羊瘙痒病(Scrapie),疯牛病(BSE)及鹿的退行性疾病(CWD).其病因是由于细胞膜表面的一种正常蛋白(PrP)转变为具有感染性蛋白酶抗性形式(PrP),很多证据证明Prion疾病是由细胞内的正常PrP蛋白转变成PrP引起.微管相关蛋白tau被认为与prion疾病中的某些GSS以及CJD的发病有关,因此我们利用RT-PCR技术,从人神经母细胞瘤系SSY-5Y克隆出tau微管结合区序列,将此基因通过测序并登录GenBank,比对发现只有一处点突变;然后亚克隆至原核表达载体pGEX-2T,通过Glutathione Sepharose 4B纯化GST-tau蛋白,免疫家兔,制备了tau多克隆抗体;生物素标记纯化的抗体,建立了tau蛋白双抗体夹心法检测方法,其最低蛋白检测量为128 pg/ml±3.2.
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