【摘 要】
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氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)是一种新型的碳纳米材料,在生物医学、环境保护、能源储存等领域都具有很广泛的应用前景。GO作为石墨烯重要的衍生物,其优良的物理化学性质促进了GO成为复合材料的支撑平台,近年来,基于GO的纳米复合材料在生物成像、生物传感以及癌症的检测和治疗中得到了广泛的探索,正逐步被考虑应用于临床诊疗,将纳米颗粒嵌入氧化石墨烯中,形成具有特殊性能的杂化材料,两种材料的特
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氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)是一种新型的碳纳米材料,在生物医学、环境保护、能源储存等领域都具有很广泛的应用前景。GO作为石墨烯重要的衍生物,其优良的物理化学性质促进了GO成为复合材料的支撑平台,近年来,基于GO的纳米复合材料在生物成像、生物传感以及癌症的检测和治疗中得到了广泛的探索,正逐步被考虑应用于临床诊疗,将纳米颗粒嵌入氧化石墨烯中,形成具有特殊性能的杂化材料,两种材料的特定协同作用不仅能够提高治疗过程的作用效率,而且能为其病理分析过程提供关键性思路,但是由于复合材料的独特属性,使其在与生物大分子相互作用的过程中表现出复杂的作用机制,这为临床的实际应用带来一些困扰,因此,基于GO的纳米复合材料与生物大分子之间的机理研究,探究复合材料在作用过程中的生物学效应,对解决其在临床应用中的实际问题具有指导性意义。本文在GO表面原位合成银纳米颗粒(AgNPs),将合成的复合材料与生物大分子(脱氧核糖核酸和胰蛋白酶)相互作用,系统地研究生物大分子在荧光性质、吸附行为、构象结构和酶活性等方面的变化,并从理论上解释相关的作用机制或分子间作用力。主要内容及结果如下:(1)GO-AgNPs对用亚甲基蓝标记的DNA的荧光特性影响由于氧化石墨烯-银纳米颗粒(GO-AgNPs)与脱氧核糖核酸(DNA)具有特殊的亲和性,因此在生物分析领域变得越来越重要,GO-AgNPs纳米复合材料普遍用作淬灭剂。本研究合成了不同比例的GO-AgNPs纳米复合材料(1:1、1:3、1:5、1:10)作为荧光淬灭剂与亚甲基蓝(MB)标记的DNA相互作用。结果表明,随着GO-AgNPs纳米复合材料浓度的增加,DNA-MB体系的荧光强度逐渐降低;AgNPs与GO对DNA-MB的淬灭现象不是简单的叠加效应,而是协同效应;合成不同配比的GO-AgNPs(1:1、1:3、1:5、1:10),他们对DNA-MB的淬灭效率随着GO/AgNPs 比例的降低而提高;通过热力学分析研究GO-AgNPs与DNA-MB的相互作用,可以得出GO-AgNPs与DNA-MB之间的分子间作用力为氢键作用。该项工作将为DNA的荧光传感提供重要的理论和实验基础。(2)GO-AgNPs与胰蛋白酶的相互作用:从吸附行为、构象变化和酶活性方面的研究由于关于GO-AgNPs是否结合并改变胰蛋白酶的结构和功能的报道相对较少,因此采用多种方法系统地表征了 GO-AgNPs与胰蛋白酶之间的分子相互作用。结果表明,GO-AgNPs与胰蛋白酶结合能形成基态复合物;GO-AgNPs对胰蛋白酶的吸附能力高于单独的GO;Langmuir-Blodgett组装法证实AgNPs不干扰GO对胰蛋白酶的吸附;与GO-AgNPs相互作用后,胰蛋白酶的二级结构和微环境发生了改变。此外,GO-AgNPs还能增强胰蛋白酶的活性,促进胰蛋白酶对牛血清蛋白(BSA)的水解。这些发现为基于氧化石墨烯的纳米复合材料在高效固定化酶中的应用提供了重要的支持。
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