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目的:1、研究富氢水对乳鼠离体脑片谷氨酸损伤后的保护作用,并探讨其在乳鼠离体脑片损伤后保护作用的最佳浓度;2、研究富氢水(hydrogen-rich water)联合丙泊酚(propofol)后处理对谷氨酸(L-Glutamic Acid,Glu)致乳鼠离体脑片损伤的保护作用,并探讨其机制。方法:1、切取并培养出生7天的SD大鼠乳鼠离体脑片,随机分为10个小组。实验分两个步骤进行。第一步:探索富氢水最佳保护浓度,5个小组分别为:25μmol/l富氢水+谷氨酸损伤组(HL25+Glu组)、50μmol/l富氢水+谷氨酸损伤组(HL50+Glu组)、100μmol/l富氢水+谷氨酸损伤组(HL100+Glu组)、200μmol/l富氢水+谷氨酸损伤组(HL200+Glu组)、300μmol/l富氢水+谷氨酸损伤组(HL300+Glu组);第二步,探讨富氢水联合丙泊酚的保护作用,5个小组分别为:正常对照组,Glu损伤组(Glu损伤组),3 mg/L丙泊酚处理组(PL3+Glu处理组),100μmol/l富氢水后处理组(HL100+Glu处理组),富氢水丙泊酚联合组(HL100+PL3+Glu处理组)。每组12例。将Glu损伤组、HL25+Glu组、HL50+Glu组、HL100+Glu组、HL200+Glu组、HL300+Glu组及PL3+Glu、HL100+Glu、HL100+PL3+Glu处理组均培养至第六天,用含1 mmol/L Glu的培养基损伤30min,建立缺血再灌注模型,损伤后将Glu损伤组移入正常的完全培养基,将HL25+Glu组、HL50+Glu组、HL100+Glu组、HL200+Glu组、HL300+Glu组及PL3+Glu、HL100+Glu、HL100+PL3+Glu处理组分别移入含相应处理药物的完全培养基中继续培养,每3小时换液一次,共8次,24小时。不同富氢水浓度组检测尼氏小体数量,药物处理组检测苏木素一伊红(HE)染色,尼氏小体计数、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)释放率、碱性成纤维生长因子(b FGF)数目的测定来比较各组脑片神经细胞的损伤程度。结果:1、与富氢水其他浓度组相比,浓度为100μmol/l的富氢水后处理组的尼氏小体数量最多;2、与正常对照组相比,Glu损伤后的各组脑片中神经细胞均受到一定程度的损伤,表现为细胞数量减少,细胞膜破碎,胞核皱缩,LDH释放率、b FGF数量明显增高;尼氏小体数量减少;3、与Glu损伤组相比,富氢水及丙泊酚后处理的各组,均能改善脑片中神经细胞形态结构受损的情况,细胞膜破损减轻,胞核较完整,均能使尼氏小体数量增加,LDH释放率及b FGF数量降低,而两者之间差异均无统计学意义;4、富氢水联合丙泊酚后处理组的尼氏小体数量较丙泊酚药物后处理组增加,LDH释放率及b FGF数量均降低;与100μmol/l的富氢水后处理组相较,药物联合组的尼氏小体数量增加,而LDH释放率及b FGF数量均增加。结论:1、不同浓度的富氢水对谷氨酸介导的乳鼠离体脑片损伤确有一定的保护作用,其中以100μmol/l为最佳;2、丙泊酚对乳鼠离体脑片谷氨酸损伤后的保护作用确切;3、富氢水联合丙泊酚对缺血再灌注损伤的保护作用较单独使用效果更好,其机制可能与减轻神经胶质细胞过度活化有关。