清热明目方经超声雾化法治疗结膜炎的应用研究

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目的:以超声雾化器为载体,观察清热明目方治疗急性结膜炎的临床疗效。方法:对308例616只眼确诊为急性结膜炎的患者根据患者的主观症状:异物感、烧灼感、痒、疼痛、畏光、流泪及裂隙灯下检查结膜充血、水肿程度,及分泌物情况随机分为三组,经统计学检验,三组总体具有可比性。治疗组110例220只眼,对照组108例216只眼,中药组90例180只眼。对照组用左氧氟沙星眼液滴眼,4次/日;治疗组在对照组基础上,加清热明目方超声雾化法熏眼,每日1次,20min/次;中药组单用清热明目方超声雾化法熏眼,每日1次,20min/次。治疗3天和1周,对患者症状、体征进行疗效评定。结果:(1)治疗组总有效率为98.19%,对照组总有效率为88.97%,中药组总有效率为88.89%;(2)治疗前后症状和体征取差值进行比较分析,P<0.05,表示差异具有显著性,总体治疗组的改善程度要高于对照组,对照组与中药组无明显差异。结论:(1)清热明目方经超声雾化法治疗急性结膜炎可以较快的改善症状,缩短疗程,疗效确切;(2)超声雾化法科学有效,用超声雾化法清热明目方治疗急性结膜炎在改善症状眼痒、异物感、烧灼感及结膜刺激征方面效果明显;(3)利用超声雾化法清热明目方治疗急性结膜炎有良好的应用前景,但其具体的作用及机理尚需进一步探讨。清热明目方经超声雾化法治疗结膜炎的实验研究第一部分结膜炎模型的建立立目的:建立可用于结膜炎疗效及作用机制分析的动物模型。方法:(1)建立日本大耳白家兔的结膜炎模型:用微量进样器分别滴入斑蝥酊50μ l,1次/d,连续3d;(2)末次刺激后30min,除正常组6只外,随机分为3组,分别为模型组,阳性对照组,清热明目组,每组6只。结果:兔眼滴入自制斑蝥酊后均呈现出闭眼,躁动等痛苦症状。治疗前除正常组外,各组动物均出现明显的炎症反应,造模成功。结论:本实验建立的家兔结膜炎模型,方法简单可行,经济实用,成模时间短,成模率高,可用于研究清热明目方超声雾化法对结膜炎模型的疗效及作用机制分析。第二部分清热明目方经超声雾化法影响结膜炎模型的作用研究目的:研究清热明目方经超声雾化法对结膜炎模型的疗效。方法:(1)取无眼疾的日本大耳白家兔3只进行清热明目方超声雾化法治疗后,于上方角膜缘前方穿刺抽取房水0.1mL,高效液相色谱法检测房水中黄芩苷的浓度,热裂解/吹扫捕集-气相色谱/质谱联用检测房水中薄荷脑的浓度;(2)建立日本大耳白家兔的结膜炎模型,除正常组6只外,随机分为模型组,阳性对照组,清热明目组,每组6只。各组确定造模成功即刻进行相应的治疗。(3)末次治疗24h后处死动物,每只动物取左眼结膜并用10%甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色,进行病理组织学观察。结果:(1)所测样品中的色谱峰与黄芩苷标准品色谱峰的保留时间与光谱图均不一致,表明样品中无黄芩苷。(2)在选定色谱条件下,薄荷脑的色谱峰有较好的分离度,与标准图谱检索匹配度较高,基本可以确定样品中有薄荷脑的存在。(3)病理组织学观察清热明目组、阳性对照组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);结论:(1)利用超声雾化法清热明目方治疗,方中的成分薄荷脑可以通过血-房水屏障;(2)虽然房水浓度检测结果为黄芩苷不能通过血-房水屏障,但因房水中所获得的黄芩苷色谱峰较大,有望通过方法改进或优化进行进一步研究。(3)对家兔结膜炎模型病理组织学观察,清热明目方超声雾化法治疗结膜炎在炎症细胞减少的同时减轻了对结膜上皮细胞的刺激,维持了杯状细胞的功能,保护眼表结构的完整性,预后良好。第三部分清热明目方经超声雾化法影响结膜炎模型的作用机制研究目的:使用斑蝥酊诱发日本大耳白家兔结膜炎基础上,研究清热明目方超声雾化法对结膜炎模型的疗效作用机制分析。方法:建立日本大耳白家兔的结膜炎模型,随机分为正常组、模型组,阳性对照组,清热明目组,末次治疗24h后处死动物,每只动物取左眼结膜并用10%甲醛固定、石蜡包埋、切片、免疫组织化学法观察IL-1β、IL-6、TNF-α的表达情况。结果:(1)IL-1β阳性对照组与清热明目组在上皮细胞层表达较少但均优于模型组。(2)IL-6着色部位在结膜上皮细胞层下。阳性对照组及中药组的表达与正常组比差别不大。(3)TNF-α主要表达于上皮细胞层,胶原纤维中也有一些表达。模型组上皮层表达最明显,阳性对照组、清热明目组与正常组比差异不大。结论:对家兔结膜炎模型的相关炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α进行免疫组织化学定位,并进行定性分析,表明结膜炎与其有密切的关系。结膜上皮炎性因子的表达可以反映疾病的严重程度。但若要对结膜炎与炎性因子的关系进行更好的解释,尚需进一步的研究。
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