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目的本项研究通过建立GDM孕鼠模型,探究在体外条件下,将人胎盘来源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)诱导分化为胰岛样细胞(Islet-like cells,ILCs)的可行性,并通过探讨二者对GDM孕鼠血糖和胎盘中妊娠期糖尿病相关生化指标脂联素(adiponectin,APN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,证实人胎盘来源间充质干细胞及其体外诱导胰岛样细胞可改善胰岛素抵抗(IR),降低血糖,对妊娠期糖尿病起明确治疗作用,并期待为日后妊娠期糖尿病的干细胞移植治疗奠定理论基础。方法在向产妇及家属说明胎盘用途,征求其同意后,收集健康足月剖宫产产妇胎盘组织。提取胎盘组织中的间充质干细胞并在体外条件下,将适量hPDMSCs定向诱导为胰岛样细胞。采用双硫腙染色法(DTZ)对诱导而来的胰岛样细胞进行特异性鉴定。10只雌性大鼠正常喂养,不予任何处置,设为A组;40只经高脂高糖喂养+链脲菌素(STZ)注射相结合的方法建立的GDM孕鼠模型设为B、C、D、E 4组。造模成功后如下设置:B组:GDM鼠未经干预组(10只)、C组:GDM鼠生理盐水干预组(10只)、D组:GDM鼠胎盘间充质干细胞干预组(10只)、E组:GDM鼠胰岛样细胞干预组(10只),随后作相应处理。于妊娠第6天,第12天,第18天测定各组孕鼠空腹血糖,并于孕鼠妊娠至18天,予5组孕鼠剖宫产术,获取各组孕鼠胎盘,采用realtime PCR技术检测胎盘中脂联素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA相对表达量并运用统计学软件分析其统计学意义。结果1、对hPDMSCs进行培养、传代,直至传至第三代hPDMSCs,于镜下观察到细胞长势良好,细胞纯净。通过流式细胞学技术鉴定其表面抗原表达情况:CD44(+)、CD105(+),证实为hPDMSCs。2、在显微镜下观察到,经过定向诱导后的细胞由圆形变为梭形,向中央靠拢并聚集成团。经双硫腙染色后在镜下呈红棕色,证实为胰岛样细胞。3、GDM鼠造模成功的标准为:血糖>16.7mmol/L。将50只孕鼠分为A、B、C、D、E5组,每组各10只,分别为正常孕鼠组、GDM鼠未经干预组、GDM鼠生理盐水干预组、GDM鼠人胎盘来源间充质细胞干预组和GDM鼠胰岛样细胞干预组。于妊娠第6天,第12天,第18天测定各组孕鼠空腹血糖,相同时间点下,B、C、D、E组GDM孕鼠血糖明显高于A组正常孕鼠,其差异具有统计学意义(P<0.05);B组(GDM鼠未经干预组)和C组(GDM鼠生理盐水干预组)的血糖相比,其差异无统计学意义(P>0.05);D组(GDM鼠胎盘间充质干细胞干预组)、E组(GDM鼠胰岛样细胞干预组)和B组、C组相比,其血糖显著下降,其差异具有统计学意义(P<0.05);与D组相比,E组妊娠第12日、第18日血糖下降更明显,其差异具有统计学意义(P<0.05);D组、E组进行组内比较,妊娠第12日血糖较妊娠第6日下降,其差异具有统计学意义(P<0.05),妊娠第18日与妊娠第12日的血糖差异无统计学意义(P>0.05)。相比A组,B组、C组胎盘组织中脂联素mRNA相对表达量显著下降,TNF-α、IL-6mRNA相对表达量明显升高,其差异具有统计学意义(P<0.05);B组和C组胎盘组织中脂联素、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量无统计学差异(P>0.05);D组、E组和B组、C组相比,胎盘中脂联素mRNA相对表达量升高,TNF-α、IL-6mRNA相对表达量降低,其差异具有统计学意义(P<0.05);E组与D组相比,E组脂联素mRNA相对表达量较D组升高,TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量较D组下降,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1、人胎盘来源间充质干细胞(hPDMSCs)和其体外诱导胰岛样细胞移植治疗均可改善IR,降低血糖,治疗GDM。2、胰岛样细胞干预组较hPDMSCs干预组,血糖下降更明显,且胎盘组织中脂联素mRNA相对表达量更高,TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量的下降也更显著,即胰岛样细胞对GDM的治疗效果优于未诱导hPDMSCs。