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本论文共包括两部分内容,第一部分为芫花化学成分研究;第二部分为钩藤质量标准研究。
第一部分:芫花化学成分的研究
芫花为瑞香科植物芫花Daphne genkwa Sieb.et Zuce的干燥花蕾,其为传统的泻下逐水药,有祛痰止咳,杀虫疗疮的功效。《本草纲目》记载芫花有催生去胎作用。文献报道芫花主要含有黄酮,二萜原酸酯,木脂素等类化合物,近年来,国内外对其引产、抗肿瘤等药用作用方面研究较多。为了进一步开发和利用芫花药材,对其化学成分进行了研究。
采用多种现代色谱技术对芫花药材进行了系统的化学成分研究。从中分离并鉴定了14个化合物,其中两个为属内首次分离得到,鉴定的化合物包括黄酮类5个,木脂素类3个,肽类2个,香豆素类1个,甾醇类3个。分离得到的黄酮类化合物为:5-羟基-7,4-二甲氧基黄酮(5-hydroxyl-7,4-dimethoxyflavone,yuanhua-2),芫花素(genkwanin,yuanhua-3),羟基芫花素(3-hydroxygenkwanin,yuanhua-6),芹菜素(apigenin,yuanhua-8),山奈酚-3-O-β-D-(6"-p-香豆酰)吡喃葡萄糖苷)(tiliroside,yuanhua-13);木脂素类化合物为:松脂醇(pinoresinol,Yuanhua-9),丁香树脂酚(syringaresinol,Yuanhua-12),落叶松脂醇((+)-lariciresinol,Yuanhua-15);肽类化合物为:金色酰胺醇酯(aurantiamide acetate,Yuanhua-4),benzoylphenylalaninol(Yuanhua-10),香豆素类化合物为:西瑞香素(daphnoretin,Yuanhua-11);甾醇类化合物为:豆甾-5-烯-3β,7β-二醇(stigmasta-5-ene-3β,7β-diol,Yuanhua-7),β-谷甾醇(β-sitoserol,yuanhua-1),胡萝卜苷(daucosterin,yuanhua-5)。
第二部分:钩藤质量标准的研究
钩藤始载于《名医别录》。为茜草科植物钩藤Uncaria rhynchopHylla(Miq.)Jacks.、大叶钩藤Uncaria macropHylla Wall.、毛钩藤Uncaria hirsuta Havil.、华钩藤Uncaria sinensis(Oliv.)Havil.或无柄果钩藤Uncaria sessilifructus Roxb.的干燥带钩茎枝。为中医儿科用药和现代治疗高血压方剂中的常用药材。
《中国药典》(2005年版一部)钩藤药材的质量标准中无定性、定量方法,只有生物碱显色反应,显然不能全面反映钩藤药材的内在质量。为了对该品种质量标准进行完善,我们对钩藤药材的质量标准进行了研究,以异钩藤碱为指标成分建立了钩藤药材的TLC薄层色谱鉴别和HPLC含量测定方法。12批钩藤药材测定结果显示,此方法操作简便,具有较好的适用性与可靠性,其中本文建立的钩藤药材薄层色谱鉴别方法己被《中国药典》(2010年版一部)收载。
超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)是指一种采用小颗粒填料色谱柱(粒径小于2 μm)和超高压系统(压力大于105kPa)的新型液相色谱技术,与传统HPLC方法相比UPLC显示了诸多优点,如高分析速度,高分离度,高检测灵敏度,节省溶剂、峰容量增加等。本论文采用UPLC方法建立了钩藤中异钩藤碱的含量测定方法,与HPLC方法进行了方法学对比。结果表明本文建立的UPLC和HPLC法均能用于钩藤药材中异钩藤碱的含量测定,HPLC分析方法能够成功地转换并优化为UPLC方法,既达到了样品分析的高通@量又得到更高的分析灵敏度。