【摘 要】
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目的:通过shRNA-USP20干扰片段敲减USP20后观察乳腺癌细胞MCF-7生物学行为改变和与ANXA2、UBE3A、p53的可能关系,以探讨USP20在乳腺癌中的作用及其机制。方法:使用shRNA-USP20干扰片段转染乳腺癌MCF-7细胞,通过q-PCR与Western blot确定出干扰效率最高的shRNA-USP20干扰片段用于后续实验;CCK8试剂盒法检测敲减USP20后细胞增殖能力
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目的:通过shRNA-USP20干扰片段敲减USP20后观察乳腺癌细胞MCF-7生物学行为改变和与ANXA2、UBE3A、p53的可能关系,以探讨USP20在乳腺癌中的作用及其机制。方法:使用shRNA-USP20干扰片段转染乳腺癌MCF-7细胞,通过q-PCR与Western blot确定出干扰效率最高的shRNA-USP20干扰片段用于后续实验;CCK8试剂盒法检测敲减USP20后细胞增殖能力;流式细胞术检测敲减USP20后细胞凋亡率;Transwell小室实验检测敲减USP20后细胞迁移侵袭能力;最后通过q-PCR和Western blot检测USP20敲减后乳腺癌细胞ANXA2、UBE3A、p53基因的mRNA和蛋白表达情况。结果:敲减组(KD)组中USP20mRNA的表达明显降低(P=0.0067),其蛋白的表达也显著降低(P=0.001);CCK8实验显示敲减USP20后MCF-7细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.05);流式细胞术显示敲减USP20后细胞凋亡率明显升高(P=0.028);Transwell小室实验显示敲减USP20后细胞迁移侵袭能力明显降低(P<0.05);敲减USP20后p53mRNA的表达明显降低(P=0.0053),p53蛋白的表达明显降低(P<0.0001),但ANXA2与UBE3A的mRNA和蛋白表达改变均无统计学意义(P>0.05)。结论:USP20影响乳腺癌细胞的增殖、凋亡和侵袭能力,USP20可能在乳腺癌的发生和发展中扮演着重要角色,其机制可能与p53有密切关系,但与UBE3A、ANXA2无明显关系。
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