ARFP在HCV感染慢性化中的作用及与TBX21基因多态性关系的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:bechametop
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是引起慢性肝炎的主要病原体之一,HCV感染极易慢性化,其慢性化率可达75%-85%,约20%的感染者将进展为肝纤维化,甚至肝癌等终末期肝病。HCV感染所引起的丙型肝炎呈全球分布,据WHO统计,目前全世界HCV感染者约有1.8亿人,严重威胁着人类的健康。目前,关于HCV感染慢性化的机制尚未完全阐明。对HCV核心基因密码子移位产生的转框蛋白(alternative reading frame protein,ARFP)的研究表明,ARFP能够引起细胞内NF-κB的持续激活,从而增强细胞抵抗TNF-α诱导凋亡的能力,抑制细胞凋亡,是HCV在细胞内建立持久感染的机制之一。此外,ARFP也可像核心蛋白(Core蛋白)一样,发挥干扰细胞周期,调节细胞增殖、凋亡,诱导免疫应答的作用。我们的研究发现,ARFP抗体阳性率与疾病进程相关,在不同临床类型丙型肝炎患者中,中重度和肝硬化患者ARFP抗体阳性率高于急性丙肝组。另外,ARFP还可能通过调节细胞免疫参与HCV感染的进程和转归。本实验室前期研究结果显示,ARFP阳性HCV患者与ARFP抗体阴性HCV患者相比,血清中γ-干扰素(gamma interferon,IFN-γ),白细胞介素-2,4,5,10(interluekin,IL-2,il-4,il-5andil-10)水平呈明显差异,在体外培养的外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,pbmc)中,arfp有上调il-4、il-5和下调ifn-γ水平的作用,提示在hcv感染者中,arfp可能通过影响th1/th2平衡,减少细胞损伤,以利于病毒细胞内寄生,导致病毒持续感染。t-bet是促进th0细胞分化和调控th1/th2细胞亚群及细胞因子平衡的关键转录因子,arfp可能通过影响该转录因子的表达而参与hcv感染的慢性化进展,因此,相关研究具有重要意义。t-bet是由tbx21基因编码的,有研究表明,该基因t-1993crs4794063)位点变异影响tbx21基因的转录活性,另还有多个snp位点与多种疾病有关,如t-1514c(rs17250932)、g-1499a(rs2074190)位点snp与hbv具有相关性,t-1993crs4794063位点变异还和自身免疫性肝炎,il-4和tnf-α的表达量有关,但该基因位点变异与hcv疾病进程的相关性,未见相关报道。为了探讨arfp参与th1/th2漂移的分子机制,本课题组构建了hcv1b型arfp基因的重组质粒pcoldii-f,经过镍离子亲和层析纯化后得到高纯度的arfp。收集慢性hcv1b型患者(chronichepatitispatient,chp)的血样,elisa定性检测arfp抗体,并依据检测结果分成2组[f-ab(+)chp、f-ab(-)chp],收集健康者血样作为对照组。用westernblotting法检测f-ab(+)chp组、f-ab(-)chp组和健康对照组的pbmc中t-bet的表达水平,并用不同浓度的arfp体外刺激pbmc,逆转录-聚合酶链反应(rt-pcr)法检测细胞中stat1和stat6的表达水平,westernblotting法检测磷酸化的stat1/6水平。结果表明,f-ab(+)chp组t-bet表达水平低于f-ab(-)chp组,stat1/6表达水平并不受arfp刺激的影响,然而,arfp可影响pbmc中stat1/6的磷酸化水平。本研究还通过分子流行病学研究方法,对江苏省句容市和镇江市的有偿献血人群进行调查,收集747名慢性hcv患者[190名f-ab(-),557名f-ab(+)]和354名健康对照,用改进的多重高温连接酶检测反应(improvedmultipleligasedetectionreaction,imldr)基因分型技术检测tbx21(编码t-bet转录因子)基因三个位点(rs17250932,rs2074190,rs4794067)等位基因的分布频率,采用病例-对照、病例-病例研究设计,分析了中国汉族人群TBX21基因多态性与HCV慢性化进程及ARFP产生的关系。结果表明rs4794067 C等位基因在CHP患者中的分布频率明显高于健康对照者,特别是在F-Ab(+)组。分层分析后发现,在HCV 1b基因型亚组和轻度肝纤维化亚组中,rs4794067 C等位基因携带者,和HCV Non-1b基因型亚组中rs2074190 G等位基因携带者,他们在HCV感染进程中,具有更高的ARFP产生风险。而在年轻的女性患者中,rs4794067 C等位基因携带者的慢性化进程的风险更高。本研究提示,TBX21的基因多态性与中国汉族高危人群的HCV感染的慢性化进程和ARFP产生显著相关。本研究综合评价HCV的生物学因素(病毒基因变异)、宿主免疫因素(Th1/Th2平衡)、遗传背景(TBX21基因多态性)和环境因素在HCV感染慢性化进程中的作用及其相互关系,初步探讨HCV ARFP参与Th1/Th2漂移的机制以及宿主因素与ARFP产生的关系,为深入研究病毒性肝炎慢性化的机制提供理论基础,对于探索HCV治疗方法具有一定意义。
其他文献
当前,我国企业财务预警系统主要存在以下问题:企业财务预警系统与管理信息系统不能有效整合,财务预警系统的有效运行缺乏组织和制度保证,忽略了定性方法在财务风险评估中的作
目的观察水化治疗对老年冠状动脉造影术后造影剂肾病(CIN)发生率的影响及护理方法。方法将210例接受冠脉造影术的老年患者(年龄≥60岁)随机分为对照组(n=106)和水化组(n=104)
<正>一、全国法院审理民间借贷案件的基本情况2008年以前,全国法院受理民间借贷纠纷案件数量相对平稳,2008年之后案件量开始大幅上升。2012年收案747809件,比2008年的488301
目的:探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)相关基因多态性与颈动脉粥样硬化(CAS)发病风险的相关性。方法:根据超声检查将439例NAFLD患者分为CAS组和非CAS组,采用多聚酶链反应(PCR)
本文以纽马克(Newmark)的文本类型和交际翻译理论为依据,提出了中式菜名翻译的基本要求,探讨了中国菜名的汉英翻译策略并认为交际翻译理论对中式菜名的翻译具有很强的适用性
目的探讨外关穴针刺与假针刺后脑功能区的激活特点。方法18例健康志愿者随机分为对照组、针刺组和假针刺组,分别施以不针刺、外关穴针刺组、外关穴假针刺组,以18F-FDG为显影
文章通过对刘家琨设计的“青浦新城建设管理中心”从社会背景、审美方式等侧面的剖析,解读他在上海青浦语境下的当代创作。同时分析了该建筑在剖面,立面及细节中的思维与创作
选定21世纪初这个重要时期,选定了传统人文学科民俗学研究与国家推行的非物质文化遗产保护工作相互结缘的契合点,展开对两者关系的解读,从而厘清两者之间存在的重要差异。从
煤工尘肺与心脑血管疾病(附162例临床分析)淮北矿务局职业病防治院(安徽淮北市相山,235000)吴莉莉,孙亚非淮北矿工总医院吴咏梅煤工尘肺(以下简称尘肺)合并或并发心脑血管病后,常常是引起死亡的
目的建立急性放射性肠炎大鼠模型。方法选择雄性SD大鼠为实验动物,采用直线加速器单次腹盆腔局部照射,观察对比照射后大鼠摄食饮水量、体质量、排便情况及自主活动情况,光镜