目的：克隆人脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor，BDNF）基因在原核与真核系统中进行重组表达，并进行表达蛋白的功能检测为开发高活性的hBDNF基因重组蛋白和基因治疗载体奠定了基础。 方法：从外周血白细胞基因组DNA中经PCR扩增出hBDNF基因片段。将其克隆至pUCm-T载体中，测序鉴定后，再定向插入原核表达载体pBV220和真核表达载体pTracer^TM-EV／V5-His。经鉴定后分别导入原核和真核细胞中进行表达。表达产物经SDS-PAGE、RT-PCR、ELISA、Dot-ELISA、MTT和促PC12生长形态学观察等方法进行其抗原和生物学活性等功能的检测。 结果：克隆的人BDNF基因测序结果与GeneBank报告的完全一致，并成功构建了原核和真核表达载体。分别在大肠杆菌和COS-7细胞中进行表达。在大肠杆菌中表达的包涵体蛋白约占菌体总蛋白的21％。通过透析复性后，获得具有活性的表达蛋白。该复性后蛋白和COS-7细胞表达产物均具有较好的抗原活性和生物学活性。 结论：通过基因重组技术获得了人BDNF基因，并在大肠杆菌和人BDNF基因在大肠杆菌与COS一7细胞中的表达及功能研究中文摘要COS一7细胞中成功表达，表达蛋白具有良好的生物学活性和抗原活性，此实验为生物工程技术研制rhBD刊下重组蛋白和基因治疗载体提供了依据。