右旋糖酐酶是一类能特异性水解右旋糖酐中的α-1,6糖苷键的葡聚糖酶,主要来源于微生物,在食品和医药领域应用广泛。本研究从连云港海域海泥中筛选到一株产右旋糖酐酶的菌株,对其进行了菌种鉴定,产酶优化,酶学性质及相关应用探索。利用蓝色葡聚糖-透明圈法分离到一株产右旋糖酐酶菌株THN1。THN1细胞呈短杆状,菌落呈黄色不透明状,边缘整齐;可利用葡萄糖,阿拉伯糖和甘露糖;THN1菌有耐盐性,能在含6%Na Cl培养基中生长;最适生长温度和p H分别为40℃和8.0。16S r DNA同源性分析鉴定该菌为纤维化菌,与纤维化纤维菌的同源性为99.7%,故命名为纤维化纤维菌（Cellulosimicrobium cellulans）THN1。通过单因素试验和响应面分析,对菌株THN1的产右旋糖酐酶条件进行优化。最佳产酶培养基为:胰蛋白胨20 g/L,右旋糖酐T20 5 g/L,麸皮5 g/L,Na Cl 10 g/L,p H8.2,陈海水配制。30℃条件下发酵24 h,发酵液上清中右旋糖酐酶酶活达到3.709 U/m L,是优化前的31倍。通过超滤浓缩、硫酸铵沉淀和离子交换层析等手段纯化获得单一条带的THN1右旋糖酐酶,将其命名为CeDex,分子量约为70 k Da,比酶活为66.04 U/mg,提升了35.51倍;CeDex的最适反应温度和p H分别是40℃和8.5,在30～40℃和p H 3.0～11.0范围内有较好的稳定性,4℃时仍有40%的催化活性;Fe3+、Co2+、Ni2+、Zn2+及Cu2+对酶有很强的抑制作用,Mg2+、Ba2+、Na+及Sr2+能显著提高酶的催化活性;CeDex水解右旋糖酐的主要产物是异麦芽三糖。CeDex是一种具有适冷、耐酸、耐碱及耐盐特性的细菌右旋糖酐酶。研究了CeDex对变异链球菌生物膜的抑制和清除作用以及酶解产物的抗氧化活性。当CeDex浓度达到10 U/m L,变异链球菌生物膜的抑制率和清除率分别为91.627%和90.572%,在扫描电镜下能明显观察到随酶浓度的增加,变异链球菌生物膜越来越少;酶解产物的浓度达到15 mg/m L时能清除90.545%的DPPH,浓度为30 mg/m L对羟自由基的清除率为71.646%,5 mg/m L时对超氧阴离子自由基清除率为62.234%,具有较好的抗氧化活性。综上所述,纤维化纤维菌THN1是一株来自海洋的新型右旋糖酐酶产生菌,通过单因素试验和响应面分析对产右旋糖酐酶条件进行优化,发酵液酶活提升了31倍;经超滤浓缩、硫酸铵沉淀和离子交换层析纯化手段得到的CeDex具有较好的酶学性质,对变异链球菌生物膜有较好的抑制和清除作用,在口腔护理行业有较高的应用价值。该论文有图32幅,表16个,参考文献142篇。