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背景:阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）是一种以大脑记忆及认知系统功能受损为主的不可逆的中枢神经系统性疾病,其典型的病理学特征包括大脑内β-淀粉样蛋白斑块沉积,以及神经元内tau蛋白过度磷酸化引起的神经纤维缠结,但具体机制仍未完全阐明。神经胶质细胞在中枢神经系统内含量丰富,参与机体内中枢系统发育的分布与调节,对神经系统网络发育起着至关重要的作用。硫酸软骨素蛋白聚糖（CSPGs）是哺乳动物中枢神经系统（CNS）中含量最丰富的蛋白聚糖,在神经系统的发育和成熟以及CNS损伤的病理反应和生化反应中发挥重要作用。和厚朴酚在医学上广泛地应用于抗菌、抗炎等领域,对中枢神经系统亦有明显的保护作用,且体外研究显示其对β-淀粉样蛋白的神经毒性具有一定抑制作用。目的:通过免疫组织化学和免疫荧光实验探究在AD病理条件下Aβ分别与神经胶质细胞激活和硫酸软骨素蛋白聚糖的相关性,以及给予和厚朴酚对APPswe小鼠前额叶皮质神经胶质细胞激活和硫酸软骨素蛋白聚糖水平的影响,探讨和厚朴酚可能的AD治疗作用,为和厚朴酚治疗AD提供一定参考和依据。方法:1.分别利用免疫组化法（IHC）和免疫荧光法（IF）检测APPswe转基因AD小鼠前额叶皮质（PFC）中β淀粉样蛋白与神经胶质细胞增生活化标志物GFAP和Iba-1的表达相关性;2.取APPswe转基因12月龄小鼠,利用IHC和IF检测在AD病理条件下,中药提取物和厚朴酚对神经胶质细胞激活的影响;3.利用IHC检测APPswe转基因小鼠PFC中β-淀粉样蛋白与硫酸软骨素蛋白聚糖Aggrecan、Neurocan和Versican的表达相关性;4.取12月龄APPswe转基因小鼠,利用IHC检测在AD病理条件下,和厚朴酚对PFC中硫酸软骨素蛋白聚糖Aggrecan、Neurocan和Versican表达的影响。结果:1.免疫组织化学染色显示12月龄APPswe小鼠PFC中Aβ水平高,则神经胶质细胞标志物GFAP和Iba-1信号水平也较高;反之,Aβ水平低,GFAP和Iba-1的表达水平也较低。Pearson相关性分析结果表明Aβ水平与GFAP（R=0.6677,P<0.05）和Iba-1（R=0.8257,P<0.05）的水平呈正相关,且与GFAP相比,Iba-1显示出与Aβ水平更高的表达相关性。与免疫组织化学结果一致,免疫荧光双标法结果亦表明小鼠PFC中较大的Aβ斑块所在区域GFAP或Iba-1荧光信号强度及范围亦大于较小的Aβ斑块所在区域GFAP或Iba-1荧光信号强度。2.免疫组织化学染色结果显示,与溶剂对照组小鼠相比,治疗组小鼠PFC中的Aβ、GFAP和Iba-1表达水平均有不同程度的降低;Aβ、GFAP和Iba-1的降低在给药后7 d最为明显,表明APPswe小鼠在给药早期和厚朴酚的治疗效果就可达到最佳状态;Aβ在给药7 d后再观察7天,斑块减少的程度要低于给药7 d后的效果,高于给药14 d后的效果,说明和厚朴酚对Aβ的治疗作用在初期达到高峰,且随着给药时间的增加药效逐渐减弱;GFAP和Iba-1在给药7 d后再观察7 d和给药14 d后的水平均低于给药7 d。免疫荧光结果显示,给药7 d、给药7 d后再观察7 d和给药14 d后,Appswe小鼠前额叶皮质中Aβ荧光信号均显著下降,同时伴有GFAP和Iba-1信号的减弱。3.免疫组织化学染色显示,12月龄APPswe小鼠前额叶皮质中,Aβ水平高,则硫酸软骨素蛋白聚糖Aggrecan、Neurocan和Versican的表达相关性信号水平也较高;当Aβ水平较低,Aggrecan、Neurocan和Versican的表达水平也较低。Pearson相关性分析结果表明Aβ水平与Aggrecan（R=0.7,P<0.05）、Neurocan（R=0.8,P<0.05）和Versican（R=0.69,P<0.05）的水平呈正相关,并且与Aggrecan和Versican相比,Neurocan显示出与Aβ水平更高的表达相关性。4.免疫组织化学染色结果表明,与溶剂对照相比,给予和厚朴酚后APPswe小鼠PFC中Aggrecan、Neurocan和Versican蛋白表达水平均存在降低的趋势;连续给药7 d组和连续给药14 d组,Aggrecan减少的程度要优于给药7 d后再观察7 d组;连续给药7 d,Neurocan下降最为显著,其次是连续给药14 d组,给药7 d再观察7 d组斑块下降程度最弱;连续给药14d组Versican下降程度最高,连续给药7 d组低于连续给药7 d组再观察7 d组和连续给药14 d组。结论:本实验结果表明:1.在AD发展过程中,伴随着Aβ斑块大小的变化,神经胶质细胞标志物和硫酸软骨素蛋白聚糖也随之改变,且呈现正相关性,表明AD病理条件下,Aβ形成在神经胶质细胞激活和硫酸软骨素蛋白聚糖表达中发挥重要作用。2.和厚朴酚可降低AD病理条件下增生活化的神经胶质细胞标志物和硫酸软骨素蛋白聚糖表达水平,进一步提示和厚朴酚可能对AD的预防和治疗提供一定参考。