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本文研究了黄芪硒多糖对体外培养的人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞的抑制增殖作用,并探讨了线粒体膜电位、细胞中活性氧、细胞中钙离子浓度,与黄芪硒多糖诱导乳腺癌肿瘤细胞凋亡的关系。在体外实验研究中,黄芪硒多糖可抑制MCF-7细胞的生长。MTT法测得黄芪硒多糖在体外实验中作用MCF-7细胞72h的半数抑制浓度IC50为14.65μg/ml,并且实验结果证实这种抑制作用呈显著的剂量依赖性。通过MTT实验方法研究的结果表明黄芪硒多糖对MCF-7细胞的生长起到显著的抑制作用。进一步通过对细胞形态学观察的研究证实了黄芪硒多糖对人体乳腺癌细胞具有诱导凋亡的作用。不同浓度的黄芪硒多糖作用于MCF-7细胞48h后,通过各组的观察可看到,阴性对照组中的细胞状态很好且排列密集,不存在细胞变形或破碎,并且随着给药浓度的逐渐增加,细胞生长的密集程度逐渐变得稀疏,细胞外形皱缩,而且高浓度组中的细胞外观变化较明显,所有细胞悬浮且破碎,没有完整的轮廓,贴壁细胞数量明显下降。这些观察证实黄芪硒多糖对MCF-7细胞具有凋亡作用,并其呈显著的剂量依赖性。接下来采用荧光显微镜对细胞形态更为细致的观察,不同浓度的黄芪硒多糖作用于MCF-7细胞48h后,采用Hoechst33258荧光染料对人体乳腺癌细胞染色,然后通过荧光显微镜的观察,结果发现黄芪硒多糖随着剂量的增加,通过表观现象明显观察到对细胞具有显著凋亡的功能,阴性对照组显示,MCF-7细胞染色质均匀,核形态为原始形态,核碎裂发生在中剂量组,高剂量组呈致密的细胞核染色,这表明黄芪硒多糖可导致人体乳腺癌细胞的外观形态发生变化。采用流式细胞仪,分析表明,不同浓度的黄芪硒多糖作用人体乳腺癌细胞MCF-7细胞48h后,有明显的凋亡峰出现,而且黄芪硒多糖组的凋亡率分别为(0.47±0.41)%,(13.89±2.93)%,(33.04±2.08)%,且凋亡峰显著性随着黄芪硒多糖的给药浓度呈现出明显的剂量依赖性。进一步说明了黄芪硒多糖对人体乳腺癌MCF-7细胞具有诱导凋亡的作用。最后根据以上实验为基础,对黄芪硒多糖诱导人体乳腺癌MCF-7的机制进行了研究,主要采用激光共聚焦显微镜对黄芪硒多糖作用人体乳腺癌MCF-7细胞48h后,对细胞中活性氧的变化、细胞中钙离子浓度的变化以及细胞中线粒体膜电位的变化进行观察。通过观察线粒体膜电位荧光强度分别为32.47±1.45,23.49±0.58和20.50±0.88。活性氧荧光度分别为:硒多糖低中高为,26.98士0.43,52.15±0.61,79.00±1.06。钙离子荧光强度分别为:硒多糖低中高为,23.41±0.53,47.37±0.92和75.90±1.14。每个组与阴性对照组比较后,发现有显著的统计学意义(P<0.05)。通过以上研究结果表明,黄芪硒多糖对人体乳腺癌细胞具有显著的抑制作用,而且通过倒置显微镜、荧光显微镜的观察以及采用PI单染法用流式细胞仪对细胞凋亡率的检测上,共同证实了黄芪硒多糖对人体乳腺癌细胞MCF-7具有诱导凋亡的作用。而且通过对作用机制的研究结果表明,黄芪硒多糖作用到细胞后,随着给药浓度的增加线粒体膜完整性被破坏,且呈现出活性氧含量升高,膜电位降低的变化,钙离子浓度骤升,从而使线粒体膜通道孔开放,最后导致细胞凋亡。这说明,黄芪硒多糖可通过线粒体途径对人体乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡。综上所述,通过体外实验研究证实,黄芪硒多糖可以诱导人体乳腺癌MCF-7发生凋亡,且发生凋亡的途径很有可能是线粒体途径。