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本论文主要研究了生米卡链霉菌与红霉素链霉菌原生质体种间融合育种，以提高麦迪霉素A1（MDMA1）的组分，增加其对丙酸盐的利用度，降低生产成本。 根据文献报道，红霉素链霉菌中的丙酸激酶对丙酸的利用率是对乙酸的利用率的13倍；而在生米卡链霉菌中，无特异的丙酸激酶，菌体对丙酸的利用低于对乙酸的利用，因此希望利用原生质体种间融合的方法将红霉素链霉菌的丙酸激酶基因转移到生米卡链霉菌中，从而使融合子能够利用丙酸盐作为合成MDMA1的前体，提高MDMA1的产量，降低生产成本。 首先在对两亲株的生物学特性进行了鉴定后，考察了影响两亲株原生质体形成和再生的主要因素，确定了生米卡链霉菌和红霉素链霉菌原生质体形成及再生的最佳条件：前者用S′培养基，在28℃、220r.min-1培养24h后，用3mg／ml的溶菌酶在32℃恒温酶解50～60min，得到的原生质体在干燥的R5′培养基上28℃倒置培养5～6天，可得到再生率在20％左右的再生菌落；后者采用二级菌丝培养，用1mg／ml的溶菌酶在37℃恒温酶解1h左右，得到的原生质体也在干燥的R5′培养基上28℃倒置培养5天，即可得到再生率在20％左右的再生菌。 其次，确定了原生质体融合的基本条件及灭活原生质体融合的条件：等量混合两亲株原生质体或用热灭活（或紫外灭活）的原生质体（＞108个／ml），用35％的PEG4000在37℃处理2min后，稀释，涂布再生，可获得融合率在50％左右的融合子。 然后，对所获得的原生质体融合子进行了反复筛选，获得了Rh107、Rh109、Rh109-2、Rh109-15等优秀的融合重组子。最后，以Rh109-2为出发菌株，对融合重组子进行了生物学特性的考察。沈阳药科大学硕士学位论文 摘要 Rh 09－2具有利用 GOI 的生物学特性，并且可以在含有较高的丙酸盐浓度的培养基上生长。正常发酵时，Rh 09－二 的发酵水平比出发菌株提高了30％：当采用丙酸盐替代原有的of前体的一半进行补料时，Rh 09－2的发酵单位没有降低，而 MDMA；的含量略有提高，从而降低了发酵成本。最后采用淀粉作为种子培养基的唯一碳源和改进的发酵补料条件，可以将MDMA；含量由80％左右提高到93％。