牛结核病(Boyine tuberculosis)是由牛分支杆菌(Mycobacterium bovine)和结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的一种人畜共患的慢性传染病。参考GeneBank中CDC1551基因序列，设计合成了一对含酶切位点的引物，从结核分支杆菌培养物中抽提总DNA，PCR扩增出CDC1551基因，克隆进pMD18-TSimple Vector，将测序正确的目的基因插入表达载体pET-32a(+)中，转化BL21(DE3)宿主菌，构建出重组表达质粒pET-CDC1551，PCR和BamHⅠ、HindⅢ酶切鉴定表明构建正确。 采集临床血样，抽提DNA进行套式PCR扩增，血样的PCR产物TB-360P的回收、纯化、克隆、鉴定和序列测定结果与参考菌株的结果完全一致。通过PCR的敏感性、特异性、重复性和稳定性试验，结果表明该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。说明建立的PCR检测方法，其试验结果是可信的。 通过几种提纯结核菌素皮内变态反应试验与PCR检测方法的临床对比试验，PCR检测可以检出阳性牛群中的PPD试验假阴性牛，挑出阴性牛群中的假阳性牛，从而减少养殖场因结核检疫造成的不必要损失。同时，与常规PPD试验检测时间相比，PCR检测大大缩短了可疑牛的复检等待时间，从而提高了牛群的净化效率，为牛结核病的诊断与检测提供了一种良好的技术手段。