利用MFLP分子标记技术分析栽培种花生遗传多样性

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花生(peanut,Arachis hypogaea L.)是中国的主要油料作物和经济作物。本研究针对花生由于分子水平上多态性的缺失而导致花生基因组的研究水平远远落后于其他作物的现状,选取包括两大亚种四大类型的花生栽培种质资源18份,采用锚定微卫星片段长度多态性(MFLP)分子标记技术,从分子水平研究栽培种花生的遗传多样性。目前,国内尚未见关于该标记方法在应用方面的研究报道。本研究采用MFLP分子标记技术应用于栽培种花生研究,获得了清晰的花生MFLP图谱,建立了MFLP技术应用于花生属研究的最佳体系。   采用该技术从195对MFLP引物组合中共得到41对具有多态性的引物,引物多态率为21.0%。利用其中扩增位点分布均匀,清晰可辨,且多态性位点比例较高的5对引物组合对18份栽培种质扩增分析。结果表明,5对MFLP引物组合共扩增出291条带,其中多态性条带236条,多态性占81.1%;平均每对引物组合可扩增出58.2条带,平均可产生47.2条多态性条带。根据扩增结果可将18份栽培种质一一区分。   利用Ntsys2.0软件对MFLP数据分析,计算供试材料的遗传相似系数,并利用UPGMA法进行聚类分析,获得聚类图。18份材料的遗传相似系数值范围为在0.31-0.83之间,平均值为0.5862。聚类结果显示,在阙值0.57处,供试材料严格按照亚种分为两大类群(Ⅰ、Ⅱ),在两大类群下,各品种也基本按照类型聚类,少数存在交叉。该结果与花生种质资源与目前国际普遍采用的分类系统基本一致。   根据实验结果得出如下结论:1.MFLP标记技术在栽培种花生具有很高的多态性检出率:2.MFLP标记技术在遗传关系及多样性分析上具有很高的效率;3.本实验的最终研究结果可为花生栽培种的分类和鉴别提供依据,也可为花生育种工作配置杂交组合提供依据。
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