【摘 要】
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目的 研究阿曼托双黄酮(AMF)的辐射防护作用机制方法 1.对C57BL/6小鼠采取预防给药,照射前腹腔注射AMF,用60Coγ射线进行一次性全身照射。C57BL/6小鼠经7.5 Gy剂量照射后,观
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目的 研究阿曼托双黄酮(AMF)的辐射防护作用机制方法 1.对C57BL/6小鼠采取预防给药,照射前腹腔注射AMF,用60Coγ射线进行一次性全身照射。C57BL/6小鼠经7.5 Gy剂量照射后,观察C57BL/6小鼠的存活率,观察时间为30 d;用Tunel和DAPI染色检测AMF对照射后C57BL/6小鼠骨髓细胞凋亡的影响;用PI染色和细胞流式检测AMF对照射后C57BL/6小鼠骨髓细胞周期的影响;Western Blot法检测AMF对照射后C57BL/6小鼠骨髓细胞中Tnfaip2蛋白表达的影响;C57BL/6小鼠经3 Gy剂量照射后,采用细胞集落培养检测AMF对照射后骨髓细胞增殖能力的影响;用CD34、CD117流式抗体双标和细胞流式检测AMF对照射后小鼠造血干细胞数目的影响。2.培养C57BL/6小鼠骨髓原代细胞,或者用MACS法分选,培养C57BL/6小鼠骨髓CD117+细胞,照射前12 h采取预防给药,然后接受12 Gy60Coγ射线一次性照射;在照后6 h、12 h,分别用Hoechst染色法检测AMF对照射后骨髓原代细胞凋亡的影响;用Tunel和DAPI染色检测AMF对照射后CD117+细胞凋亡的影响;用PI染色和细胞流式检测对AMF对照射后两种细胞周期的影响;用Elisa法检测对AMF对照射后两种细胞培养上清中TNF-α浓度的影响;RT-PCR检测对Tnfaip2表达的影响。结果 1.AMF可以提高7.5 Gy致死剂量照射后C57BL/6小鼠30%的存活率,且延长了小鼠的存活时间;AMF可以降低辐射后细胞的凋亡,对辐射后细胞的增值能力的恢复也有所帮助,但对造血干细胞的数目未表现出显著的保护作用;2.AMF能够缓解辐射后C57BL/6小鼠骨髓原代细胞和C57BL/6小鼠骨髓CD117+细胞的凋亡;降低两种细胞培养基中TNF-α的表达。结论 AMF具有一定的抗辐射作用,它可能是通过抑制辐射后TNF-α的表达、调节辐射引起的细胞周期紊乱来降低细胞凋亡而发挥辐射防护作用。
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