【背景和目的】:骨质疏松多发于老年群体及绝经后的女性群体,分为年龄相关的骨质疏松和绝经后骨质疏松,患者骨密度降低,骨小梁数量减少,骨折风险增加。而且骨质疏松骨折后易引起其他并发症,影响患者生活质量,带来一系列社会经济学问题。骨质疏松是一种由骨代谢异常导致的退行性疾病,而骨代谢是由控制骨形成的细胞——成骨细胞,和调控骨吸收的细胞——破骨细胞共同作用的,骨质疏松的发病主要是由于破骨细胞活性大于成骨细胞活性导致的。已应用的治疗骨质疏松的药物也主要是通过调控这两种细胞的活性进行治疗。miRNA是一类长度为18-25个核苷酸的非编码小RNA,主要通过降解mRNA的3’-UTR和抑制转录后翻译来调控基因的表达。诸多研究证明miRNA能调控成骨细胞和破骨细胞的增殖,分化和凋亡,同时miRNA也在骨质疏松疾病的发生发展及诊断治疗中起到重要作用。本研究通过芯片筛选出和绝经后骨质疏松相关的miRNA,并研究其对成骨细胞和破骨细胞的调控,试图为骨质疏松的治疗寻找新靶点和新的机制。【方法】:本研究利用了外加雌激素刺激和OVX导致的雌激素缺失模型,检测了雌激素对骨髓单核巨噬细胞（BMM）增殖、凋亡和破骨分化的影响。并用雌激素受体抑制剂阻断了雌激素受体,以验证雌激素对BMM增殖、凋亡和破骨分化的影响是否通过雌激素受体（ER）介导。随后我们构建了双侧卵巢切除（OVX）导致的骨质疏松小鼠模型,在假手术组（sham）和OVX组之间用miRNA芯片筛选出明显变化的miR-146a。构建miR-146a敲基因小鼠(miR-146a^-/-),并在野生型（WT）和miR-146a^-/-小鼠中构建OVX模型,利用microCT对其骨微结构进行分析,同时对组织内?血清内?细胞内相关标志物进行检测。体外过表达和降低miR-146a并检测其对成骨细胞和破骨细胞分化的影响。体外共培养WT-sham?WT-OVX和miR-146a^-/--sham?miR-146a^-/--OVX小鼠的成骨细胞和破骨细胞,检测其培养上清中相关细胞因子的表达。【结果】:雌激素能抑制BMM增殖和破骨分化,促进BMM凋亡,且这一作用是通过ER介导的。miR-146a在雌激素缺失的骨质疏松小鼠中表达明显升高。miR-146a miR-146a^-/-小鼠与WT小鼠骨量无明显差异,但骨转换率增加。MiR-146a抑制成骨细胞和破骨细胞分化。WT小鼠OVX后骨量减少,破骨细胞活性增强;miR-146a^-/-小鼠OVX后骨量不仅没有下降,反而上升,破骨细胞的活性未见增强,同时其骨微环境中M-CSF?RANKL/OPG含量下降。【结论】:miR-146a负调控成骨细胞与破骨细胞分化。在雌激素缺失引起的骨质疏松中,敲除miR-146a能降低骨微环境中的M-CSF?RANKL/OPG含量,从而降低破骨细胞活性,保护骨量丢失。