研究目的:宫腔粘连（Intrauterine adhesion,IUA）是由于子宫内膜基底层损伤引起的子宫腔和/或子宫颈管部分或完全闭塞,它也是子宫不孕症最常见的原因。本病的传统治疗方法是宫腔镜下粘连切除后再结合各种辅助治疗的应用,这些抗粘连策略有一些缺点和不足,这些原因都迫使宫腔粘连继续研究进一步探索新的治疗方案。脂肪间充质干细胞（ADSCs）属于间充质干细胞一种类型,它在再生医学领域应用相当有前景。为了提高MSCs在子宫内膜的局部存留和利用率,我们的实验使用了一种具有三维聚合物网络的材料,它是生物活性水凝胶,模拟了组织的微环境和微结构,支持三维的组织样生长在体外和体内。该课题探讨小鼠自体ADSCs联合Shake Gel TM3D通过激活BMP7-Smad5信号通路治疗宫腔粘连（IUA）的疗效。研究内容:首先鉴定从小鼠的腹股沟手术获得的白色脂肪组织中分离培养的细胞是ADSCs,然后将小鼠的自体ADSCs与凝胶结合用于治疗宫腔粘连模型的小鼠,检查相关指标证明宫腔粘连恢复,进一步检测BMP7、Smad5表达水平的变化。研究方法:从小鼠腹股沟白色脂肪组织中分离提取自体ADSCs,并通过流式、成脂诱导分化、成骨诱导分化和成软骨分化诱导来鉴定ADSCs;ADSCs与Shake GelTM3D结合培养,通过CCK-8检测ADSCs在Shake Gel TM3D的生长活性的变化;在ADSCs培养到第二代时,采用机械损伤的方法建立小鼠宫腔粘连模型;建模第7天后,将培养到第三代的自体ADSCs结合Shake Gel TM3D按照小鼠的耳标一一对应的直接局部注入小鼠子宫;移植治疗7 d后,采用HE染色、Masson染色分析子宫内膜的形态学变化、子宫内膜腺体数量、子宫内膜纤维化面积及用q RT-PCR和免疫组化方法检测纤维化生物标志物分析,同时检测BMP7和Smad5的表达水平的变化,并评价治疗后小鼠不孕功能的恢复情况。研究结果:荧光激活细胞分选（FACS）的结果是自体ADSCs表达CD105（99.1%）、CD29（99.6%）、CD73（98.9%）、CD34（0.46%）、CD45（3.26%）;细胞能够诱导成脂、成骨、成软骨细胞。CCK-8结果显示自体ADSCs在Shake Gel TM3D中仍能保持良好的生长状态。组织学检查发现ADSCs+Gel组的子宫内膜腺体数目明显增多,纤维化面积减少,纤维化相关指标α-SMA、TGF-β1也相应的减少,同时在ADSCs+Gel组中BMP7和Smad5表达显著上调,最终能够恢复到Sham组的70%左右。研究结论:第一,脂肪间充质干细胞与Shake Gel TM3D共同培养后,ADSCs能够保持良好的功能和维持生长,凝胶为ADSCs创造可行的三维生长环境。第二,自体ADSCs联合Shake Gel TM3D移植可促进受损子宫内膜组织恢复,使子宫内膜增厚,腺体数量增加,纤维化减少,进一步恢复子宫受孕的功能。第三,与单独ADSCs和Gel治疗组相比,自体ADSCs联合凝胶可使BMP7和Smad5的表达增加,提示自体ADSCs联合Shake Gel TM3D移植可通过BMP7-Smad5信号通路促进子宫内膜修复。