目的：1.观察活血通痹汤塌渍疗法治疗寒凝血瘀型膝骨关节炎(KOA)的临床疗效及对患者血清中IL.1D、TNF—Q表达水平的影响。
　　2.探讨活血通痹汤塌渍疗法对KOA软骨细胞中Wnt/β-catenin信号轴上游基因Wnt5a、下游基因MMP-7、MMP一9、关键蛋白β-catenin及其所介导的炎症因子IL一1β、TNF-α表达水平的影响。
　　方法：1.收集符合纳入标准的KOA患者共90例，随机分成治疗组和对照组各45例，治疗组予中药塌渍疗法(活血通痹汤)治疗，对照组予扶他林外涂治疗，分别记录每个KOA患者治疗前后的VAS疼痛评分、膝关节骨关节炎严重指数(ISOA)、中医证候评分，并采用ELISA方法检测患者血清中IL-1β、TNF-α水平。
　　2.将72只新西兰大白兔随机分为6组，每组各12只：①空白组;②模型组;③扶他林外涂对照组;④中药塌渍治疗组(32℃);⑤中药塌渍治疗组(37℃);⑥中药塌渍治疗组(42℃);采取木瓜蛋白酶诱导动物膝关节骨关节炎方法进行造模，从造模开始后第5周对③、④、⑤、⑥组分别给予外用扶他林及不同温度中药外治干预，空白及模型组正常饲养，干预周期为4周，用药28天后处死兔子，然后取兔子软骨及静脉血进行指标检测。RT-PCR法检测Wnt5a、MMP-7、MMP-9mRNA的表达量;Western blot法检测β-catenin蛋白表达：ELISA法检测血清中IL-1β、TNF-α水平。
　　结果：1.临床治疗疗效比较：治疗组与对照组相比，治疗组明显改善VAS疼痛评分、膝关节骨关节炎严重指数(ISOA)、中医证候评分，明显优于对照组(P＜0.05);治疗后血清中IL-1β及TNF-α较治疗前降低，且治疗组优于对照组(P＜O.01)。
　　2.ELISA法检测血清中IL-1B、TNF-α表达量：治疗组与空白组相比，治疗组IL-1β、TNF-α表达量较高，差异有统计学意义(P＜0.01)。治疗组与模型组相比，治疗组IL-1β、TNF-α表达量较低，差异有统计学意义P＜0.01)。治疗组组内比较，IL-1β及TNF-α表达量从高到低依次是32℃中药塌渍组、扶他林对照组、37℃中药塌渍组、42℃中药塌渍组。差异有明显统计学意义(P＜0.01)。
　　3.RT-PCR法检测Wnt5a、MMP-7、MMP-9mRNA的表达量：空白对照组Wnt5a、MMP-7、MMP-9mRNA的表达量最低，模型组软骨组织的mRNA的表达量均最高，治疗组mRNA的表达量均高于空白对照组而低于模型组。Wnt5a mRNA的表达量扶他林组与37℃中药塌渍组比较差异无统计学意义（P＞O.05)，其余治疗组组内比较差异有统计学意义(P＜0.05)。MMP-7mRNA的表达量扶他林组与37℃中药塌渍组比较差异无统计学意义(P＞O.05)，其余治疗组组内比较差异有统计学意义(P＜O.05)。MMP-9mRNAmRNA的表达量从高到低依次是32℃中药塌渍组、扶他林对照组及37℃中药塌渍组、42℃中药塌渍组，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　4.Western blot法检测软骨组织中β-catenin蛋白表达：空白对照组软骨组织的β-catenin表达水平最低，模型组表达水平最高，治疗组表达水平均高于空白对照组而低于模型组，治疗组组内比较，表达水平从高到低依次是32℃中药塌渍组、37℃中药塌渍组、扶他林对照组、42℃中药塌渍组，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论：1.中药塌渍法对寒凝血瘀型KOA患者的VAS疼痛评分、膝关节骨关节炎严重指数(ISOA)、中医证候评分有明显改善作用，并能明显降低患者血清中IL-1β及TNF-α的表达。
　　2.中药塌渍法可通过调控Wnt/β-catenin信号通路，抑制软骨细胞中β-catenin蛋白表达，减少Wnt5a、MMP-7、MMP-9mRNA的表达，进而减少血清中IL-1β、TNF-α的水平。