反义PG基因植物表达载体的构建及对河套蜜瓜的转化

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本实验用设计好的两条75bp的长引物进行PCR反应,扩增出甜瓜PG1基因的128bp 的片段 ,将其克隆到pMD18-T载体中,筛选反向克隆, 然后将其反向构建到植物表达载体pBINYXW的CaMV35S启动子和TMV增强子“Ω”的下游,构建成反义表达载体pUC38-PG。用PCR鉴定重组子,并经序列分析证明获得含有反向插入PG基因片段的植物表达载体。通过花粉管通道法转化河套蜜瓜,共获204颗瓜,柱头涂抹、子房注射和柱头切割三种转化方法的结实率分别为39.92%、34.48%和28.70%,其中柱头涂抹和柱头切割在α=0.05水平下有显著差异。
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