Rab/Ypt/Sec4家族是Ras超家族中的重要成员,在调控细胞内膜泡运输、细胞迁移、侵袭等过程中起重要作用。其家族成员与疾病及肿瘤发生发展关系密切。Rab19是Rab家族中的重要成员,定位于7号染色体上,与Rab43序列具有较高的相似性。关于Rab19的功能,目前还没有深入的研究报道。本文构建了 Rab19表达载体,通过免疫荧光技术,发现过表达的Rab19在细胞内具有明显的囊泡结构并且与高尔基体有明显共定位,对维持高尔基体结构完整有重要作用。为了进一步研究Rab19的性质与功能,我们拟制备兔抗Rab19多克隆抗体,通过分析Rab19氨基酸序列,利用PCR扩增Rab19序列,构建了pGEX-4T-1-Rab19质粒。诱导表达、纯化获得GST-Rab19融合蛋白,免疫健康新西兰大白兔,最终制备了抗Rab19的抗体。制备的抗体在免疫印迹中可以特异性地识别外源和内源的Rab19,免疫荧光显微实验显示制备的抗体能够识别外源Rab19。制备的抗体检测组织中Rab19的内源表达,结果表明其在组织中的表达具有特异性,在脾、肺中有较高水平表达,在肾中表达水平较低,与报道中Rab19 mRNA表达水平相符。为了进一步研究Rab19蛋白的功能,采用Large Scale Pull-down的方法,以GST-Rab19作为诱饵蛋白,从小鼠肺组织裂解液中钓取与Rab19相互作用的蛋白。进一步鉴定分析得到若干蛋白,选取其中4个(Kxd1,Syngr3,Scamp5,Tmem33)比较有价值的蛋白进行相互作用进一步验证。本论文结果为进一步深入研究Rab19的生物学功能奠定了基础。