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目的研究β2肾上腺素受体激动剂莱克多巴胺（Ractopamine, RAC）给药1天和给药14天后,不同剂量和不同恢复时间对雄性成年大鼠睾丸波形蛋白（Vimentin, Vim）表达的影响,在分子水平探讨RAC对雄（男）性睾丸的影响及相关机制,以期为进一步研究β2肾上腺素受体激动剂对雄（男）性生殖系统的影响及食品安全提供实验依据。材料与方法1.实验动物及试剂实验动物均选取9-10周龄清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠,体重200～220 g,分笼饲养于动物房。每天光照12 h,适应性喂养1周后用于实验。每天定时定量灌胃给药,给药前禁食,给药后喂食。实验试剂为RAC,均溶于生理盐水至1 ml。2.动物分组及给药2.1 RAC给药1天实验SD大鼠35只,随机均分成7组,每组5只,分笼饲养于动物房,适应性喂养1周后用于实验。实验试剂RAC溶于生理盐水至1 ml,给药方式为灌胃给药,给药时间为1天。给药剂量分别为：A组（200mg kg-1bw day-1）、B组（20 mg kg-1bw day-1）、C组（2 mg kg-1bw day-1）、A’组（200mg kg-1bw day-1）、B’组（20 mg kg-1bw day-1）、C’组（2 mg kg-1 bw day-1）和K组（0 mg kg-1 bw day-1）。其中,A、B和C组给药结束后恢复1天处死；A’、B’和C’组给药结束后恢复7天处死；K组为对照组,以等体积的生理盐水替代。2.2 RAC给药14天实验SD大鼠65只,随机均分成13组,每组5只,分笼饲养于动物房,适应性喂养1周后用于实验。实验试剂RAC溶于生理盐水至1 ml,给药方式为灌胃给药,给药时间14天。给药剂量分别为：D （200 mg kg-1 bw day-1）、E （20 mg kg-1 bw day-1）、F （2 mg kg-1 bw day-1）.D’（200 mg kg-1 bw day-1）、E’（20 mg kg-1 bw day-1）、F’（2 mg kg-1 bw day-1）、H （2 mg kg-1 bw day-1）、I （0.2 mg kg-1 bw day-1）、J （0.02 mg kg-1 bw day-1）、H’（2 mg kg-1 bw day-1）、I’（0.2 mg kg-1 bw day-1）、J’（0.02 mg kg-1 bw day-1）和K’（0 mgkg-1 bw day-1）.其中,H、I和J组给药结束后恢复1天处死；D、E、F、H’、I’和J’组给药结束后恢复7天处死；D’、E’和F’组给药结束后恢复21天处死；K’组为对照组,以等体积的生理盐水替代。3.实验方法检测各组大鼠体重、睾丸湿重及睾丸脏器系数的变化；半定量反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测大鼠睾丸Vim mRNA的表达；Western blotting检测大鼠睾丸Vim和类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）蛋白质的表达。所有数据均以（x±s）表示,应用统计学软件SPSS13.0对数据进行单因素方差分析,P<0.05视为有统计学差异。结果1.大鼠体重、睾丸湿重及睾丸脏器系数RAC给药1天各实验组（A,组除外）大鼠体重、睾丸湿重及睾丸脏器系数与对照组K相比均无显著差异；RAC给药14天,D-F组、D’-F’组以及H’组,大鼠体重与对照组K’相比均显著增加（P<0.05）,其余各组大鼠体重与对照组相比均无显著差异（P>0.05）,各组大鼠睾丸湿重及睾丸脏器系数与对照组K’相比均无显著差异（P>0.05）。2.大鼠睾丸Vim mRNA的表达半定量RT-PCR结果显示,RAC给药1天各实验组大鼠睾丸Vim mRNA的表达与对照组K相比均无显著差异（P>0.05）；RAC给药14天大鼠睾丸Vim mRNA的表达,D组与对照组K’相比显著增强（P<0.01）,E、D’及E’组与对照组K’相比显著增强（P<0.05）,其余各组与对照组K’相比均无显著性差异（P>0.05）。3.大鼠睾丸Vim和StAR蛋白质的表达Western blotting结果显示,RAC给药1天各实验组大鼠睾丸Vim和StAR蛋白质的表达与对照组K相比均无显著差异（P>0.05）。RAC给药14天,D、E、D’、E’及H组Vim蛋白质的表达与对照组K’相比显著增强（P<0.05）,其它各组Vim蛋白质的表达与对照组K’相比均无显著差异（P>0.05）；D-F’组及H组其StAR蛋白质的表达与对照组K’相比显著降低（P<0.01）,H’组显著降低（P<0.05）,其余各组StAR蛋白质的表达与对照组K,相比均无显著差异（P>0.05）。结论1.RAC能显著增加大鼠体重,但对睾丸湿重及睾丸脏器系数的影响无显著意义。提示RAC可通过增加蛋白质合成,降低蛋白质分解来增加大鼠体重。2.RAC能显著增强Vim mRNA的表达,且RAC对大鼠睾丸Vim mRNA表达的影响有剂量和时间相关性。提示RAC能在转录水平影响Vim的表达。3.RAC能显著增强Vim蛋白质的表达,并随给药剂量的增加,Vim的表达有增强的趋势。提示RAC可在翻译的水平影响并上调Vim蛋白质的表达。Vim表达的升高是否会影响大鼠睾丸正常的生精功能尚需进一步研究。4.RAC可显著降低StAR蛋白质的表达,且RAC对大鼠睾丸StAR表达的影响有剂量和时间相关性。提示RAC在翻译水平能影响并下调StAR蛋白质的表达,这可能会影响到雄激素的合成,进而影响睾丸细胞的正常功能。