迟缓爱德华菌外膜蛋白的蛋白组学分析

被引量 : 1次 | 上传用户:tianwaiyun6
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
迟缓爱德华菌是水产动物的主要致病菌,可导致多种淡水鱼和海洋鱼出现全身性出血性败血、皮肤肿胀腐烂、脏器的坏死等病征,造成大批量死亡,给水产养殖业带来巨大的经济损失。本研究试图发现迟缓爱德华菌的共同抗原,为迟缓爱德华亚单位疫苗的研发提供条件。首先,本研究采用Sarkosyl法提取迟缓爱德华菌ET-202的外膜蛋白,利用双向电泳技术得到其外膜蛋白图谱,切取143个蛋白点进行质谱分析,共检测到66个蛋白点。通过Swiss.Prot在线数据库对这些蛋白点进行功能分析和亚细胞定位。从中发现5个与毒力相关的蛋白分别定位在分泌系统、细胞膜和外周胞质,12个与运输相关的外膜蛋白定位在细胞外膜,3个与抗菌素耐药性有关的蛋白定位在细胞内膜;并发现定位在细胞质中的一些与核酸、氨基酸、蛋白质、碳水化合物、脂类等代谢有关的蛋白。为迟缓爱德华菌的致病机制的研究提供了参考。其次,为了找出不同来源菌株之间的共同抗原,用本实验室已制备的4种针对不同来源迟缓爱德华菌外膜蛋白的牙鲆抗血清对迟缓爱德华菌ET-202的OMPs2DE胶进行Western-blotting分析发现在50kDa-36kDa处有4个能被4种抗血清识别的蛋白,而对照组也出现这四个免疫反应点。为了进一步验证,我们又采集真鲷血清、石斑鱼血清和不同来源牙鲆血清进行Western-blotting分析,结果显示这些血清均可识别ET-202OMPs50kDa-36kDa处的这四个蛋白。推测未免疫鱼受易感病原菌的侵染,而病原菌的抗原蛋白可能存在共同的抗原表位。为了进一步研究不同病原菌的共同抗原。本实验利用双向电泳、Western-blotting和质谱技术对迟缓爱德华菌、嗜水气单胞菌、创伤弧菌和溶藻弧菌四种菌的外膜蛋白进行蛋白组学分析。四种菌的1D SDS-PAGE图显示在50kDa-36kDa之间有相似的条带,利用双向电泳技术的到其外膜蛋白的2DE图谱,并通过Western-blotting验证,其50kDa-36kDa之间均有能被同种抗血清共同识别的蛋白点,而同时未免疫的对照血清也识别这些蛋白。通过质谱分析嗜水气单胞菌和迟缓爱德华菌ET-202OMPs免疫蛋白点,发现有相似之处。说明两者可能存在共有的抗原,不同菌之间共同抗原的存在,为研制多种菌外膜蛋白的亚单位疫苗提供了可能。
其他文献
高校思想政治理论课实践教学形式应包括课内实践、校内课外实践和社会实践三种形式:这三种实践教学形式在思想政治理论课实践教学目标体系中表现出层次性和逻辑性。在实践教学
目的:探讨对会阴侧切分娩后和剖宫产术后产妇发生尿潴留的护理干预及效果。方法:对我院妇产科2011年12月~2012年12月第一胎分娩患者会阴侧切分娩后和剖宫产术后的产妇给予系统
1 概况 东陇海老线穿过软土地区,地基未做处理,由于路基长期下沉和基床病害严重,1985年决定改线。新线仍然穿过软土地区,路基设计时考虑了路堤的临界高度。除个别地段铺设土
目的:观察穴位贴敷联合超短波及调制中频电疗治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法:120例患者随机分为治疗组、对照组各60例,2组行超短波和调制中频电疗治疗,治疗组加穴位贴敷治疗
目的探究糖皮质激素联合特布他林治疗急性加重期慢阻肺的临床效果。方法选取2014年12月至2016年5月解放军第一五二中心医院收治的急性加重期慢阻肺患者84例,将其按照随机原则
网络环境下自主探究学习模式在Flash动画课程中的教学实践证明,采用新的教学模式可以改变传统的以教授为主的教学结构,充分体现学生的主体地位,调动了学生学习的积极性,取得
秋季是板蓝根病害的多发期,病害严重时会影响其产量和质量。现将板蓝根在秋季易发生的几种常见病害的症状和防治方法介绍如下:一、霜霉病1.症状:危害叶部。植株下部靠近地面的叶
目的探讨银杏内酯N(ginkgolide N,GN)对局灶性脑缺血再灌注(MCAO)损伤大鼠的保护作用。方法采用栓线法大鼠缺血2 h再灌注22 h模型,以银杏内酯B为阳性对照,探讨银杏内酯N对MCAO大
随着新课程教育的不断改革,出现了许多新兴的学习方式,这些学习方式不仅提高了学生的学习兴趣,也提高他们的综合素质。比如课堂讨论法就是一种高效的教学方式。课堂讨论法一
分析了重油催化装置在加工进口常压重油时分馏塔出现结盐的原因,总结了不停工处理分馏塔结盐方法和经验教训。