【摘 要】
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菌核病是油菜最主要的病害且防控困难,对我国油菜产业造成巨大经济损失。当前亟需筛选具有广谱抗性的因子并解析其抗病机理,为遗传改良和选育抗病品种提供新的种质资源和理论基础。植物受到病原菌侵染时,将会从正常的生长发育转向防御反应信号途径,发生转录组的重编程过程,而中介因子复合体MED和延伸因子复合体ELP这两类转录因子是参与这一过程的关键因子,但对于其具体的抗性机制仍有待深入研究。在另一方面,植物的细胞
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菌核病是油菜最主要的病害且防控困难,对我国油菜产业造成巨大经济损失。当前亟需筛选具有广谱抗性的因子并解析其抗病机理,为遗传改良和选育抗病品种提供新的种质资源和理论基础。植物受到病原菌侵染时,将会从正常的生长发育转向防御反应信号途径,发生转录组的重编程过程,而中介因子复合体MED和延伸因子复合体ELP这两类转录因子是参与这一过程的关键因子,但对于其具体的抗性机制仍有待深入研究。在另一方面,植物的细胞壁不仅是植物对外界环境的结构性被动防御屏障,细胞壁的结构成分改变或受到的细微损伤都会引起植物抗病信号途径的激活和防卫反应的活化,但目前只在模式植物拟南芥中有些许研究,在作物中鲜有报道。本研究以甘蓝型油菜为主要研究对象,从病原菌与植物互作引发的植物免疫反应源头处着手,深入解析转录因子在油菜抗菌核病过程中的功能,研究结果将为油菜抗菌核病育种提供科学依据和种质资源。主要结果如下:1.通过对转录因子MED家族基因和ELP家族基因在油菜接菌后的表达模式进行分析,发现BnMED16和BnELP2、BnELP3、BnELP4等基因的表达水平均受到显著的诱导;2.通过在油菜中转入BnMED16超表达载体构建BnMED16超表达转基因株系,对其接菌后发现超表达BnMED16株系通过增强防御基因的表达、激活抗病相关信号途径、促进活性氧的积累及清除以及诱导植物细胞壁抗性,从而提高对核盘菌的抗性;3.通过对BnMED16和BnMED25、BnMED16和BnWRKY33进行点对点酵母双杂实验发现BnMED16和BnMED25及BnWRKY33均能够发生互作,且BiFC实验进一步验证了其在体内的相互作用,推测BnMED16通过与BnMED25蛋白互作,从而控制茉莉酸信号途径的激活强度来提升油菜对菌核病的抗性;4.通过构建BnELP4超表达载体并将其转化到油菜中,得到BnELP4超表达转基因株系;对表达量升高明显的株系进行离体叶片接菌实验后发现超表达BnELP4基因能够明显增强防御基因的表达、激活抗病信号通路并促进活性氧的积累和清除来增强油菜对菌核病的抗性;但BnELP家族介导油菜抗菌核病机制有待进一步研究。
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