家蚕（Bombyx moriL.）对农药十分敏感，桑园又和农田连在一起，农药漂移污染桑叶后极易引起家蚕中毒。本研究拟建立农药对家蚕的慢性毒性评价方法，选择吡虫啉和乐果为代表性药剂，探明农药非致死剂量对家蚕的生物学参数、经济学指标的影响，评价其对家蚕的慢性毒性大小；并检测家蚕解毒酶活性的变化，探讨其作为慢性毒性评价指标的可行性。本研究对完善我国农药环境毒性风险评价体系，指导桑树病虫害防治和安全养蚕均有较大意义。通过采用食下毒叶法、浸叶法和定量喷雾法3种方法分别测定了5种代表性药剂对家蚕的急性毒性。结果表明：3种方法所测5种药剂对家蚕96h的LC50值相比，均以定量喷雾法的为最大，食下毒叶法和浸叶法的LC50值为定量喷雾法的1/2左右，表明后两种方法测得的毒性虚高了1倍左右。定量喷雾法定量精准，适合用于家蚕慢性毒性试验。研究建立了农药对家蚕的慢性毒性试验方法。以乐果作为标准药剂，采用定量喷雾法，在实验室用potter喷雾装置将药液定量喷于桑叶的背面，以初始喷雾体积为2mL或4mL（根据桑叶质量决定）、喷雾压力7psi、沉降时间为20s作为标准参数。晾干后将每片叶子的叶柄插入灌满琼脂的离心管(1.5mL)中后转入通风式昆虫毒性试验培养装置。针对家蚕的生长发育特点，设计2龄蚕和5龄蚕两个阶段进行给药处理。将乐果稀释5~6个系列浓度，供试家蚕为2龄起蚕或5龄起蚕，每处理10头蚕，重复3次。于上簇后第8d测经济学指标。结果表明：用非致死剂量乐果处理家蚕幼虫，高浓度处理较低浓度处理对家蚕生物学参数、经济学指标影响大。其中乐果最高浓度40.0mg/kg桑叶与对照相比，在2龄阶段给药，其2龄、3龄、4龄、5龄发育历期分别延长1.92%、3.81%、3.93%、4.22%，2眠、3眠、4眠、熟蚕质量分别降低7.57%、8.10%、3.64%、5.32%，全茧量、茧层量分别降低13.7%、10.9%；在5龄阶段给药，5龄发育历期延长5.79%，熟蚕质量降低7.88%，全茧量、茧层量分别降低16.2%、17.3%；5龄给药较2龄给药全茧量和茧层量分别降低3.05%和1.80%，表明5龄给药对经济学指标的影响更大。以5龄期家蚕为试验虫态建立慢性毒性试验方法，其试验结果更准确可靠。乐果对家蚕慢性毒性的最低可观察效应剂量为16.0mg/kg桑叶，对2龄家蚕96小时LC50值为824mg/kg桑叶，慢性毒性适合的处理剂量大约是LC50值的1/51.5。利用建立的农药对家蚕慢性毒性试验方法测定了吡虫啉对家蚕的慢性毒性。结果表明：非致死剂量吡虫啉对家蚕的生物学参数、经济学指标的影响随药剂浓度的增高而变大。吡虫啉最高浓度0.0500mg/kg桑叶与对照相比，在2龄阶段给药，2龄、3龄、4龄、5龄发育历期分别延长1.68%、5.36%、6.01%、7.41%，2眠、3眠、4眠、熟蚕质量分别减轻8.92%、10.5%、5.58%、7.83%，全茧量、茧层量分别减轻14.8%、16.8%；5龄阶段给药，5龄发育历期延长9.63%，熟蚕质量降低11.3%，全茧量、茧层量分别减轻16.4%、19.8%；5龄给药较2龄给药全茧量和茧层量分别降低9.99%和3.70%，说明5龄给药对经济学指标的影响更大，5龄给药与2龄给药相比更为敏感。吡虫啉对家蚕慢性毒性的最低可观察效应剂量为0.0200mg/kg桑叶，对2龄家蚕96小时LC50值为0.905mg/kg桑叶，慢性毒性适合的处理剂量大约是LC50值的1/45.5。测定了不同龄期家蚕解毒酶活性。研究表明，家蚕羧酸酯酶比活力随龄期增大而升高；家蚕谷胱甘肽-S-转移酶比活力随龄期增大而降低。分别用非致死剂量的吡虫啉处理幼蚕，短期内羧酸酯酶比活力均上升，且高浓度处理组上升幅度最大，但与对照相比无显著性差异。对于谷胱甘肽-S-转移酶比活力，2龄阶段给药，浓度较高处理0.0200mg/kg桑叶与对照相比有显著性差异，但随着龄期的增加，显著性差异消失；5龄阶段给药，浓度为0.0200mg/kg桑叶的处理与对照相比，其比活力有显著性差异，2处理浓度之间无显著性差异。因此，解毒酶的变化规律尚不能作为检测家蚕慢性毒性的评价指标。