小麦作为我国四大主粮作物之一,在农业生产中的地位不可或缺。由禾谷丝核菌（Rhizoctonia cerealis）引起的小麦纹枯病（wheat sharp eyespots）是世界性土传小麦病害,严重时可造成小麦减产40%。目前生产中缺乏抗或耐受纹枯病的小麦品种,因此防治小麦纹枯病的主要策略是化学和生物防治。化学防治易造成环境的污染和病原菌的抗药性,生物防治对使用环境的要求较高,抗病品种的选育需较高的技术手段且耗时较长。因此有必要针对小麦纹枯病进行多样化的防治策略,充分了解病原菌禾谷丝核菌的致病机制是前提条件。然而,由于缺少稳定的遗传转化体系,禾谷丝核菌致病相关基因的功能研究受到严重限制。近年来,随着基因干扰（RNAi）或基因沉默技术在基因功能研究上的应用,开始有研究者采用基因沉默的方法来研究丝核菌致病相关基因的功能。本研究以常用杀菌剂戊唑醇和噻呋酰胺的靶标CYP51和Sdh为目标基因,从禾谷丝核菌基因组中搜索到CYP51的三个同源基因和Sdh的B、C、D亚基序列,以其为靶标基因,进行基因沉默的研究,研究结果如下:1、体外合成这些药剂靶标的ds RNA,使用喷雾诱导基因沉默的方法对大麦叶片和PDA平板上的禾谷丝核菌菌株R0301进行处理。结果表明药剂靶标ds RNA对R0301的生长和侵染能力具有抑制作用。在被侵染的大麦叶片上,外源ds RNA能够显著抑制病菌中对应基因的表达。其中防治效果最好的靶标基因是Rc CYP51-2和Rc CYP51-3。100 ng/μl浓度的Rc CYP51-3-ds RNA在大麦叶片上抑菌效果较为显著,且可以同时抑制3个Rc CYP51同源基因的表达。2、构建大麦条纹花叶病毒组分γ::target gene载体,体外转录大麦条纹花叶病毒各组分,将其混合涂抹到小麦叶片上。待病毒在小麦体内成功侵染转录后,在小麦叶片上转接R0301菌碟并保湿处理。结果表明在小麦体内转录的靶标基因ds RNA对R0301的侵染具有抑制作用。其中病斑最小的是Rc CYP51-1和Sdh C两个基因ds RNA处理后的叶片。3、上述研究证明了杀菌剂靶标基因的ds RNA可以有效抑制禾谷丝核菌的生长,具有防治小麦纹枯病的潜力。但是使用试剂盒合成的ds RNA成本较高,不适合大范围应用。因此本研究构建了L4440::Rc CYP51-2载体,转化至工程菌——大肠杆菌HT115中,经IPTG诱导,摇培扩繁生成大量的药剂靶标基因ds RNA。同时合成效率可达每毫升培养液中含有2.1μg ds RNA,与试剂盒合成效率相当,大大降低了成本。综上所述,本研究进一步明确了戊唑醇和噻呋酰胺两种杀菌剂在禾谷丝核菌中的靶标基因,探索了两种抑制禾谷丝核菌基因表达的方法,为使用喷雾诱导基因沉默（SIGS）方法以及寄主诱导基因沉默（HIGS）研究丝核菌基因功能奠定了基础。同时可以将本文研究的药剂靶标的ds RNA通过原核表达的方法低成本且高效地合成,为大田应用防治小麦纹枯病奠定基础。