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目的:以树鼩为研究对象，初步探讨研究肾虚血瘀证老年性痴呆树鼩动物模型建立的最佳方法并以田七益智颗粒方进行药效评价。从而为中医以树鼩为对象、民族医药防治老年性痴呆及相关药物的研发提供稳定、可重复的中医病证结合动物模型。 方法:老年痴呆病模型的建立:以正常饲养的树鼩为对象，随机分为5组:空白组，0.96％D-半乳糖组，1.92％D-半乳糖组，Aβ23-35+IBO(5μg+5μg)组，Aβ23-35+IBO(10μg+5μg)组。将不同浓度的D-半乳糖分别按0.5ml/100g的体重剂量腹腔注射，每天一次，连续6周;第7周开始树鼩脑室双侧大脑Meynert基底核注射鹅膏蕈氨酸(IBO)。Aβ23-35+IBO两组分别直接在树鼩脑室双侧大脑Meynert基底核注射Aβ23-35+IBO混合液，空白组注射等剂量的生理盐水，制备老年痴呆动物模型。以Morris水迷宫实验为基础探索测定树鼩的行为学;高压液相色谱法测定脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量;westernblot检测脑组织Aβ、APP和磷酸化tau蛋白的表达;HE染色法检测树鼩海马区脑组织病理形态变化以及免疫组化法检测脑内突触素(SYP)、乙酰胆碱转移酶(Chat)的活性。 肾虚血瘀证模型的建立:以正常饲养的树鼩为对象，随机分为3组:空白组，肾虚血瘀证模型1组，肾虚血瘀证模型2组:模型1、2组在第1-3天腹腔注射1mg/100g的氢化可的松，第4、5天继续腹腔注射1.5mg/100g的氢化可的松;在第6-8天，模型1组腹腔注射肾上腺素1mg/100g;模型2组腹腔注射角叉菜胶7.5mg/100g。通过观察记录树鼩一般体质形态特征变化以及比较脏器指数体现动物模型的表证情况;采用化学发光法测定血浆FT3、FT4、E2、T的含量变化;血液流变仪分别测定全血高切、全血中切Ⅰ、全血低切Ⅰ、全血低切Ⅱ的粘度、血浆粘度、红细胞压积高切还原粘度、中切还原粘度、低切还原粘度、卡松粘度、卡松屈服应力、以及纤维蛋白原。 肾虚血瘀证老年痴呆树鼩动物模型的初步建立与药效评价:将正常饲养的雄性树鼩随机分为4组，每组15只:空白组、老年性痴呆病组（以下简称AD组）、肾虚血瘀证老年痴呆病组（以下简称病证结合组）、田七益智颗粒方药效评价组（以下简称给药组）。AD病组、病证结合组、给药组分别脑室双侧注射Aβ23-35和IBO的混合液，制备老年痴呆树鼩模型。脑部注射伤口愈合后，病证结合组、给药组在第1-3天腹腔注射氢化可的松1mg/100g，第4-6天皮下注射肾上腺素0.1mg/100g;第7天开始对给药组灌胃给予田七益智方药液1ml/100g.d，连续10天;空白组注射等量的生理盐水。通过观察记录树鼩体质质量及一般状态;高压液相色谱法测定脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量;western blot检测脑组织Aβ、APP和磷酸化tau蛋白的表达;HE染色法检测树鼩海马区脑组织病理形态变化以及乙酰胆碱转移酶(Chat)、免疫组化法检测脑内突触素(SYP)的活性;血凝仪测定凝血四项指标;采用化学发光法测定树鼩血清中FT3、FT4、E2、T、CORT的含量变化。 结果:由于树鼩怕水不会游泳的特性，本课题以Morris水迷宫基础上的对树鼩行为学检测的探索结果均无差异性，没有统计学意义。故暂未探索出适合检测树鼩行为学的方法。高效液相色谱仪检测结果显示，与空白组对比，模型组树鼩脑组织单胺类递质去甲肾上腺素的含量有所减少，1.92％D-半乳糖组、Aβ23-35+IBO10ug/ml组有显著差异（P＜0.05）。经western blot检测分析，各模型组Aβ23-35、APP、磷酸化-tau(P-tau)的条带颜色均比空白组加深增多，其中以1.92％D-半乳糖组、Aβ23-35+IBO(10ug+5ug)组最为明显，统计分析有显著性差异(P＜0.05);D-半乳糖造模组、Aβ23-35+IBO造模组中，同组之间的高剂量与低剂量比较，具有显著性差异(P＜0.05)。HE染色病理切片结果显示空白组未见病理形态改变，镜下神经元细胞结构完整，细胞未见变形、固缩等改变;两组造模组的低剂量可见海马区神经元细胞形态发生改变，核固缩成不规则形三角形，胞浆、胞核界限不明显，细胞变得稀疏，锥体细胞变小、缺失;而高剂量组海马区神经元细胞变性坏死程度呈加重趋势，细胞周围间隙过大，排列紊乱，锥体细胞变小、缺失，死亡。免疫组化染色结果显示，空白组有较多的Chat免疫阳性神经元细胞和SYP免疫阳性神经元细胞，细胞胞体较大且排列紧密，多为圆形或椭圆形;造模低剂量组则Chat免疫阳性神经元数量明显减少，胞体缩小，出现核固缩，排列较松散;造模高剂量组的Chat免疫阳性神经元和SYP免疫阳性神经元细胞形状严重变形，数量较少，且神经元细胞破裂，缺失。造模组组海马区SYP免疫阳性神经元细胞平均截面积、平均光密度和Chat免疫阳性细胞平均截面积、平均光密度均有所下降;与空白组比较，造模组海马区SYP免疫阳性神经元细胞平均截面积和Chat免疫阳性神经元细胞平均截面积均有显著性差异(P＜0.01)，SYP免疫阳性神经元细胞平均光密度有显著性差异(P＜0.01)。 肾虚血瘀证模型:与空白组比较，造模组精神萎靡倦怠、身体蜷缩、竖毛、少动、喜卧、皮毛蓬乱无光泽，容易掉毛，体重减轻。经血液流变仪检测，模型1组除中切还原黏度、低切还原黏度外，其全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、卡松黏度、卡松屈服应力、纤维蛋白原与空白组比较均有升高，有显著性差异（P＜0.05）。与空白组对比，模型2组血液FT3、FT4、E2的含量降低，具有显著性差异(P＜0.05);而模型1、2组的E2含量与空白组比较，均有显著性差异（P＜0.05）。 肾虚血瘀证老年痴呆树鼩动物模型的初步建立与药效评:与空白组比较，各造模组的树鼩精神萎靡、倦怠，竖毛，少动，容易掉毛，体重减轻，甚至死亡。而给药组随着时间的延长，其精神状态、体毛、体重、活动度渐趋于正常;相比空白组，AD病组、病证结合组、给药组的肾指数、睾丸指数以及病证结合组的前列腺指数均有均有降低的趋势，具有显著性差异(P＜0.05);高效液相色谱仪检测结果显示，与空白组比较，病证结合组树鼩脑组织中NE的含量减少明显，具有显著性差异(P＜0.05);经western blot检测分析，AD病组、病证结合组中的Aβ23-35、APP、磷酸化-tau的条带颜色均比空白组加深增多，其中病证结合组最为明显，统计分析有显著性差异（P＜0.05）;而给药组条带与空白组无明显差异，与AD病组、病证结合组差异较大，统计分析有显著差异(P＜0.05);HE染色病理切片结果显示空白组、给药组均未见病理形态改变，镜下神经元细胞结构完整，细胞核呈圆形，胞浆丰富，体细胞结构连接紧密，细胞未见变形、固缩等改变;AD病组、病证结合组可见海马区神经元细胞形态发生改变，核固缩成不规则形，胞浆、胞核界限不明显，细胞变得稀疏，核固缩、胞体缺失;免疫组化染色结果显示，空白组有较多的Chat免疫阳性神经元和SYP免疫阳性神经元，其阳性神经元主要存在于胞浆与包膜内，细胞胞体较大且排列紧密，多为中等大小圆形或椭圆形;AD病组、病证结合组则Chat免疫阳性神经元数量明显减少，胞体缩小，出现核固缩，排列较松散，数量较少，且神经元细胞破裂，缺失;与空白组比较，AD病组、病证结合组海马区SYP免疫阳性神经元细胞平均截面积和Chat免疫阳性细胞平均截面积均有显著性差异(P＜0.05)，给药组与空白组无明显差异;血凝仪检测结果显示，与空白组比较，病证结合组的凝血酶原时间(PT)，AD病组、病证结合组、给药组的活化部分凝血酶原时间(APTT)，AD病组的纤维蛋白原以及A）病组、病证结合组的凝血酶时间(TT)均有所下降，具有显著性差异(P＜0.05);与空白在比较，各造模组的FT3、T均减少，具有显著差异性（P＜0.05），病证结合组的FT4具有显著性差异（P＜0.05）;与给药组比较，空白组的FT4、T、CORT无明显差异，而AD病组、病证结合组的CORT明显减少，具有显著差异(P＜0.05)。 结论: (1)以树鼩为对象，脑室双侧大脑Meynert基底核注射Aβ+IBO复合腹腔注射氢化可的松、皮下注射肾上腺素可初步制作肾虚血瘀证老年痴呆病树鼩动物模型; (2)田七益智颗粒方能够明显改善模型动物的自主活动度下降、免疫功能低下，脑中单胺类递质、脑内海马区神经元细胞突触素以及乙酰胆碱转移酶的减少，血清中FT3、FT4、皮质酮和睾酮变化及体重下降，这进一步验证该模型能够模拟树鼩的肾虚血瘀型痴呆模型。