稳定转染靶向bcl-2的shRNA对胃癌SGC-7901细胞株5-FU/DDP敏感性的影响

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目的:探讨稳定转染靶向bcl-2的小发夹RNA对胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡及化疗敏感性的影响。方法:构建针对bcl-2的小发夹RNA质粒表达载体,转入SGC-7901细胞,筛选稳定转染的细胞克隆继续压力培养。不同浓度的5-Fu或DDP作用于稳定转染靶向Bcl-2 shRNA的胃癌SGC-7901细胞。RT-PCR法检测稳定转染后SGC-7901细胞bcl-2 mRNA的表达,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:稳定转染shRNA后,SGC-7901细胞的bcl-2 mRNA表达明显下降;细胞增殖能力及细胞凋亡率无明显变化。稳定转染组5-Fu的IC。。为14.36±1.63mg/L,未转染对照组为35.62±1.95 mg/L(p<0.05);稳定转染组DDP的IC50为2.53±0.46mg/L,未转染对照组为6.89±0.52mg/L(p<0.05),流式细胞术显示稳定转染组凋亡率明显增高(p<0.05)。结论:稳定转染shRNA能长效的抑制bcl-2 mRNA的表达,对细胞的增殖及凋亡无明显影响,能增加了5-Fu及DDP的化疗敏感性,为后续基因治疗研究提供实验依据。
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