论文部分内容阅读
目的：采用APAP（对乙酰氨基酚，以下均以APAP简称）复制药物性肝损伤的动物模型，研究药物性肝损伤早期生物标志物的变化，探讨保肝颗粒对APAP致大鼠药物性肝损伤的影响。 方法：购得144只大鼠（Wistar），雌雄各半。先适应性喂养1周，随机分为空白组、模型组、联苯双酯组、保肝颗粒低、中、高剂量组6个组，每24只一组，雌雄各半饲养。各组在末次给药1h后，除空白组外给予其余5组灌胃1250mg/kg APAP溶液复制急性药物性肝损伤模型，之后禁食不禁水，制备肝损伤模型。空白组与模型组每日灌胃0.9%氯化钠(按20ml?kg-1体积)；把浓度为0.1875mg?mL-1的联苯双酯组按20ml?kg-1灌胃，保肝颗粒的低、中、高剂量组按20ml?kg-1灌胃，灌胃浓度分别为0.85、1.7、3.4g?L-1，中药组的有效剂量为0.34g?kg-1(生药含量)。给予大鼠APAP3h、6h、12h、24h后处理各组动物。称量大鼠体重，用10%水合氯醛3ml?kg-1麻醉动物；取腹主动脉血检测生物标志物和肝功能指标。取肝脏后，HE染色，之后放于显微镜下观察组织病理学的变化；使用ELISA(酶联免疫法)观察GLDH、α-GST、PNP、Arg1、TNF、IL-6的水平。 结果：1.大鼠肝功能：造模成功后3h后，和空白组相比，模型组的检测项目ALT、AST、TBIL的值无明显变化(P＞0.05)；造模成功6h、12h、24h后，和空白组相比，模型组的ALT、AST、ALP、TBIL的值均显著升高（P＜0.05）。与模型组相比，在3h，联苯双酯组和保肝颗粒给药组均可使ALP的值显著降低（P＜0.05）；6h，联苯双酯组和保肝颗粒给药组均可使ALP、TBIL的值显著降低（P＜0.05）；12h，联苯双酯组和保肝颗粒给药组均可使ALT、AST、ALP的值显著降低（P＜0.05）；24h，联苯双酯组和保肝颗粒给药组均可使ALT、AST、ALP、TBIL的值显著降低（P＜0.05）。 2.早期生物标志物：造模成功后，和空白组相比，模型组血清GLDH、PNP、α-GST、Arg1，匀浆GLDH、PNP、α-GST、Arg1升高。其中，血清GLDH、PNP、α-GST、Arg1的值在造模后3h就已经升高（P＜0.05）；匀浆GLDH、PNP、α-GST、Arg1的值同样在造模后3h就已开始升高（P＜0.05）。与ALT、AST造模成功6h、12h、24h后升高相比，GLDH、α-GST、Arg1、PNP的值升高时间早。 3.肝组织病理的改变：对于空白组而言，其肝组织的组织形态和病理学均正常；对于模型组，可发现有大量肝细胞坏死和空泡样变性情况出现，伴有明显的炎性细胞浸润；对比各给药组，发现模型组的上述改变均得以一定程度的改善。 结论：1.在肝损伤早期，早期生物标志物GLDH、PNP、α-GST、Arg1较ALT、AST升高时间早，幅度大。 2.保肝颗粒对APAP诱导肝损伤有较好的干预作用。