【摘 要】
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稻瘟病菌是引起水稻稻瘟病的病原菌,是研究寄主植物与病原丝状真菌互作机制的重要模式生物。在酿酒酵母中,Gyp1是高尔基体相关蛋白,是重要的Rab GTP酶激活蛋白家族成员之一,
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稻瘟病菌是引起水稻稻瘟病的病原菌,是研究寄主植物与病原丝状真菌互作机制的重要模式生物。在酿酒酵母中,Gyp1是高尔基体相关蛋白,是重要的Rab GTP酶激活蛋白家族成员之一,在内质网到细胞膜之间的囊泡转运过程中起关键的调控作用。本研究对稻瘟病菌Gyp1同源物MoGyp1的功能进行了初步分析。利用同源重组的原理,将MoGyp1编码基因敲除,获得三个突变体,分别是△Mogyp1-30、△Mogyp1-31 和 △Mogyp1-38。表型分析表明,与野生型 Guy11 和互补菌株△Mogyp1-com-38相比,敲除突变体的生长速率明显减慢,菌落出现严重的黑色素累积,基本不产生分生孢子,完全丧失了对水稻和大麦的致病性。应用共聚焦显微镜观察稻瘟病菌MoGyp1蛋白定位发现,MoGyp1-GFP可以与被FM4-64染色的亚细胞结构共定位,表明MoGyp1可能定位在细胞的内膜系统。此外,值得注意的是,在固体培养基上,△Mogyp1突变体菌落出现了角突变。将角突变区域进行分离,我们获得了 10个△Mogyp1角突变子,其中一些角突变子在生长、产孢和致病上都有不同程度的恢复。这些结果表明,MoGYP1敲除可能会激活一些未知的补偿反应,从而修复敲除突变体自身缺陷,提高菌株生存能力。
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