麻疹是儿童常见的急性传染病,人作为麻疹病毒的宿主,目前仍然缺乏有效的动物模型研究麻疹病毒的感染和侵害机制。人CD46（h CD46）作为麻疹病毒的受体,构建表达h CD46的转基因小鼠可用于麻疹病毒的感染、侵害机制的研究及疫苗新药的研发。而在病毒感染的初期,生物个体本身会分泌大量的干扰素来应对急性病毒感染,I型干扰素受体1（IFNAR1）是干扰素的通用受体,如果将小鼠?F1NAR基因敲除,可显著增加麻疹病毒的易感性。本课题结合转基因技术和基因编辑技术,构建麻疹病毒易感小鼠模型。本研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,敲除?FNAR1的编码序列,产生基因敲除小鼠;然后采用DNA原核注射的技术方法制备出h CD46转基因小鼠;最后,通过杂交育种的方式获得?FNAR1-/-/h CD46+/-小鼠模型。首先应用CRISPR/Cas9技术,以小鼠?FNAR1基因第二外显子为靶位点,设计识别3个位点的g RNA（IFN1-g RNA1、IFN1-g RNA2、IFN1-g RNA3）,构建表达载体先在细胞水平验证其编辑效率,细胞水平编辑效率分别为33.2%、38.3%、36.1%。编辑效率较高的2条g RNA和Cas9蛋白、Cas9 m RNA共注射到受精卵胞质,注射胚胎202枚,存活190枚注射胚胎,移植到7只假孕受体中,共出生26只小鼠,经T7E1突变检测实验和T克隆测序,证实25只为?FNAR1敲除阳性鼠,且其中1只为纯合子,突变率为96.2%。然后通过全基因合成的方式得到h CD46 c DNA,构建成p CAGGS-h CD46表达载体,并在细胞中证实h CD46能够表达;随后用Sal I和Hind III酶切,回收得到h CD46基因表达片段用于显微注射;通过DNA原核显微注射将基因片段注入到小鼠受精卵原核中,获得转基因小鼠。共注射992枚胚胎,存活胚胎685枚,移植到28只假孕受体中,共出生45只小鼠,经PCR检测其中4只为阳性鼠。对F0代鼠进行了繁殖,产生的F1代鼠携带该基因,证明在转基因鼠中该基因能稳定传递给后代。本课题成功构建了h CD46转基因、?FNAR1基因敲除小鼠,并且发现引入Cas9蛋白后,优化CRISPR/Cas9显微共注射体系可以高效的获得基因敲除小鼠。产生的基因型能稳定传递给后代,经进一步杂交育种得到?FNAR1-/-h CD46+/-基因型,将为麻疹病毒的感染侵害机制研究提供理想的动物模型。