肝癌是世界第六大常见恶性肿瘤,且已成为肿瘤相关性疾病死亡的第四大原因。Hippo信号通路中YAP（Yes相关蛋白）被认为是一种致癌性蛋白,在许多肿瘤组织中高表达,沉默YAP表达后,肿瘤进展会受到抑制。许多研究已经表明紫草素具有抗肿瘤活性,但其抗肿瘤作用的详细分子机制还有待继续阐明,且紫草素能否通过Hippo-YAP途径抑制肝癌细胞生长尚不清楚。本研究以Hep G2和Hep3B细胞为研究对象,旨在探讨紫草素是否通过对Hippo-YAP信号通路的调控而发挥其抗肿瘤作用。方法:1.通过MTT法、克隆形成实验检测经紫草素处理后的肝癌细胞的存活率和克隆形成能力,通过划痕愈合实验检测细胞的迁移能力。2.通过q RT-PCR技术检测经紫草素处理后的肝癌细胞中YAP的m RNA水平,免疫荧光和核质蛋白分离实验用于检测细胞核内YAP蛋白水平,Western Blot用于检测YAP及其下游靶基因ctgf和cyr61的表达。3.通过转染YAP质粒或YAP-si RNA改变肝癌细胞内YAP蛋白水平,然后利用MTT法和Transwell实验检测YAP蛋白水平对紫草素作用于肝癌细胞的影响。4.利用裸鼠移植瘤模型检测紫草素对荷瘤小鼠肿瘤体积和重量的影响,并以免疫荧光检测肿瘤组织中YAP蛋白水平,以Western Blot检测肿瘤组织中YAP及其下游靶基因ctgf和cyr61的表达。结果:1.紫草素能够明显抑制肝癌细胞的生长、克隆形成能力和迁移能力。2.紫草素能够明显降低肝癌细胞中YAP的m RNA和蛋白水平,抑制YAP下游靶基因ctgf和cyr61的表达,同时降低了细胞核内YAP蛋白水平。3.在肝癌细胞中过表达YAP能够促进细胞生长,提高细胞的侵袭能力,且降低了紫草素的抗肝癌作用;敲低YAP表达能够抑制细胞生长,降低细胞的侵袭能力,且促进了紫草素的抗肝癌作用。4.在裸鼠移植瘤模型体内,紫草素能明显抑制肿瘤生长,降低肿瘤组织中YAP及其下游靶基因ctgf和cyr61的表达。结论:紫草素能够显著抑制肝癌细胞的生长和迁移能力,同时还可以抑制荷瘤裸鼠的肿瘤生长,上述作用是通过其对Hippo-YAP通路中YAP的调控实现的。