放疗联合抗PD-1抗体协同抑制小鼠Lewis肺癌生长的机制研究

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目的:观察放射治疗联合抗PD-1抗体对Lewis肺癌小鼠模型原位肿瘤和远隔肿瘤生长的抑制作用,分析联合治疗对小鼠体内CD8+T细胞和调节性T细胞亚群(Treg)的影响,并探索新型的放疗联合免疫治疗的抗肿瘤方法。  方法:构建C57BL/6小鼠Lewis肺癌原位肿瘤(右后肢)和远隔肿瘤(左颈部)模型,将小鼠随机分为四组,分别予荷瘤小鼠PBS、抗PD-1抗体、原位肿瘤局部放疗和放疗联合抗PD-1抗体治疗,监测各组小鼠原位肿瘤和远隔肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线;小鼠荷瘤24天后,无菌剥离小鼠肿瘤组织、脾脏和淋巴结,制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测各组织内免疫细胞亚群的频率或表型。  结果:在小鼠Lewis肺癌模型中,放疗联合抗PD-1抗体能够增强抗肿瘤免疫应答,协同抑制小鼠原位肿瘤和远隔肿瘤的生长(P<0.05,P<0.01);流式检测结果显示联合治疗可上调小鼠肿瘤微环境和外周淋巴结中CD8+T细胞比例(P<0.05,P<0.01),提示联合治疗可促进肿瘤微环境和外周淋巴结CD8+T细胞增殖活化;同时,放疗可导致肿瘤微环境中Treg细胞显著增多(P<0.001),采用抗CD25抗体清除Treg细胞可进一步提高放疗联合抗PD-1抗体的抗肿瘤效果,抑制小鼠肿瘤生长,特别是原位肿瘤(P<0.05)。  结论:放射治疗联合抗PD-1抗体可延缓Lewis肺癌生长,促进CD8+T细胞增殖活化,提高小鼠抗肿瘤免疫;靶向清除Treg细胞可进一步提高联合治疗的抗肿瘤作用。
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