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目的:建立稳定高表达PRMT2剪接体的甲状腺癌TT细胞系;研究PRMT2剪接体过表达对甲状腺癌TT细胞生长的影响;研究高表达PRMT2剪接体对人甲状腺癌TT细胞E2F1基因表达的影响。方法:应用Lipofectamine 2000将真核表达载体pcDNA3.2/V5-PRMT2α、pc DNA3.2/V5-PRMT2β、pcDNA3.2/V5-PRMT2γ和空载体pcDNA3.2/V5导入TT细胞中,经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养;采用RT-PCR和Western Blot鉴定稳定表达PRMT2剪接体的TT细胞系,通过间接免疫荧光观察PRMT2剪接体在TT细胞中的蛋白荧光分布;应用MTT比色法测定PRMT2剪接体对TT细胞增殖活性的影响;平皿集落形成法测定PRMT2剪接体抑制体外培养TT细胞的锚定依赖性生长作用;最后,Western Blot检测稳定转染人甲状腺癌TT细胞中E2F1蛋白表达的水平。结果:RT-PCR及Western Blot结果显示转染质粒[pcDNA3.2/V5-PRMT2α、pcDNA3.2/V5-PRMT2β、pcDNA3.2/V5-PRMT2γ]细胞的PRMT2剪接体表达水平增加;间接免疫荧光结果显示转染质粒[pcDNA3.2/V5-PRMT2α、pcDNA3.2/V5 -PRMT2β、pcDNA3.2/V5-PRMT2γ]细胞内PRMT2蛋白荧光强度较对照组增强,并且主要集中在胞浆;MTT比色法测定结果显示:PRMT2剪接体对人甲状腺癌TT细胞增殖活性有不同程度的抑制作用,抑制率IR分别为33.75%,36.38%,37.21%,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);平皿集落形成法的结果显示:PRMT2剪接体对人甲状腺癌TT细胞锚定依赖性生长具有明显的抑制作用,集落抑制率分别为62.2%,45.2%,65.2%,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);Western Blot结果显示转染质粒[pcDNA3.2/V5-PRMT2α、pcDNA3.2/V5-PRMT2β、pcDNA3.2/V5-PRMT2γ]TT细胞中E2F1蛋白表达水平下调。结论:稳定高表达PRMT2剪接体对TT细胞的生长有抑制作用;稳定高表达PRMT2剪接体能下调TT细胞E2F1蛋白的表达。